[发明专利]从黑木耳中分离制备β-葡聚糖的方法

权利要求书

1.从黑木耳中分离制备β-葡聚糖的方法，其特征在于以下步骤：

(1)采用沸水浸提黑木耳干粉中的多糖，得到黑木耳多糖提取液；

(2)将黑木耳多糖提取液真空浓缩至含固形物质量分数40％-50％；

(3)在上述浓缩液中加入5-10倍体积的无水乙醇，得到醇沉多糖，将其真空浓缩干燥，得到 固体黑木耳多糖提物；

(4)采用逆流色谱方法分离纯化黑木耳多糖提取物；

溶剂系统由常温常压下处于固体的聚乙二醇1000、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和处于液体 的水组成；先用水溶解聚乙二醇1000，使溶液达到饱和，再添加磷酸二氢钠和磷酸氢二钠使 聚乙二醇1000饱和溶液分层，磷酸二氢钠、磷酸氢二钠的使用重量比为1∶3～3∶1；上相做固 定相，下相做流动相；

(5)收集逆流色谱分离的β-葡聚糖组分，用截留分子量为20kDa的透析袋流水透析去除溶剂 中的磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和聚乙二醇1000，得到β-葡聚糖水溶液；

(6)将β-葡聚糖水溶液真空浓缩至固形物质量分数达到60％以上，再采用冷冻干燥，得到纯 化的β-葡聚糖粉末。

2.根据权利要求1所述从黑木耳中分离制备β-葡聚糖的方法，其特征在于步骤(1)所 述的浸提过程是：采用沸水浸提溶剂与黑木耳干粉的液料体积比为5～10∶1，条件为温度100 ℃，浸提时间2小时，浸提次数2～3次。

3.根据权利要求1所述从黑木耳中分离制备β-葡聚糖的方法，其特征在于：步骤(2) 和步骤(3)所述真空浓缩的真空度低于0.09Mpa，温度为50～60℃。

4.根据权利要求1所述从黑木耳中分离制备β-葡聚糖的方法，其特征在于步骤(4)所 述逆流色谱方法为：采用逆流色谱仪为分离设备，用泵将上述溶剂系统的上相注入逆流色谱 仪的色谱柱，并取上述溶剂系统的部分上相溶解固体黑木耳多糖提物制备逆流色谱样品溶液； 开启逆流色谱仪和流动相输液泵，将样品溶液和流动相输入逆流色谱分离柱；部分收集器收 集流出组分，用薄层层析的方法检测各组分，并收集β-葡聚糖组分。

5.根据权利要求1所述从黑木耳中分离制备β-葡聚糖的方法，其特征在于：步骤(4) 所述逆流色谱方法所用的逆流色谱仪为高速逆流色谱仪HSCCC。

6.根据权利要求1所述从黑木耳中分离制备β-葡聚糖的方法，其特征在于：步骤(6) 所述冷冻干燥的真空度低于50Pa，温度低于-35℃。