[发明专利]一种疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法

权利要求书

1.一种疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

(1)胞二磷胆碱转化液经酶灭活、离心和超滤预处理；

(2)将预处理后的胞二磷胆碱转化液调pH2.0～14.0后，加入无机盐配制成含有0.01～5mol/L无机盐和0.1～40g/L胞二磷胆碱的上柱液，经疏水层析树脂吸附，再经pH2.0～14.0的纯水洗脱；

(3)将洗脱液经纳滤脱盐浓缩、结晶得到胞二磷胆碱。

2.根据权利要求1所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于步骤(1)中，调节胞二磷胆碱转化液pH值至2.0～3.0使酶灭活，再经6000～12000rpm离心分离10～60min，取上清液经截留分子量为3000～8000Dolton的超滤膜超滤。

3.根据权利要求2所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于步骤(1)中，调节胞二磷胆碱转化液pH值至2.0使酶灭活，再经8000～10000rpm离心分离15～20min，取上清液经截留分子量为5000～6000Dolton的超滤膜超滤。

4.根据权利要求1所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于步骤(2)中，所述的无机盐为无机钠盐或无机钾盐或无机铵盐。

5.根据权利要求1所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于步骤(2)中，所述的疏水层析树脂为以聚苯乙烯、聚丙烯酸或缩聚酚醛为惰性骨架，以磺酸基、磷酸基、砷酸基或硒酸基作为功能基团的树脂，所述的疏水层析树脂经过0.01～5mol/L无机盐水溶液浸泡1～48h后使用。

6.根据权利要求5所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于所述的无机盐为无机钠盐或无机钾盐或无机铵盐。

7.根据权利要求1所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于步骤(2)中，将预处理后的胞二磷胆碱转化液调pH2.0～5.0后，加入无机盐配制成含有1～3mol/L无机盐和5～15g/L胞二磷胆碱的上柱液，经疏水层析树脂吸附，再经pH7.0～10.0的纯水洗脱。

8.根据权利要求1或7所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于步骤(2)中，吸附流速为10～100mL/min，洗脱流速为5～50mL/min。

9.根据权利要求8所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于步骤(2)中，吸附流速为30～50mL/min，洗脱流速为10～20mL/min。

10.根据权利要求1所述的疏水层析分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于步骤(3)中，所述的纳滤，其纳滤膜截留分子量为100～300Dolton。