[发明专利]一种蔗糖异构酶基因及其高效表达方法

权利要求书

1.一种蔗糖异构酶基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种权利要求1所述基因的编码蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

3.一种表达载体，其特征在于包含权利要求1所述的蔗糖异构酶基因。

4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于所述表达载体为pET22b(+)。

5.一种大肠杆菌细胞，其特征在于包含权利要求1所述的蔗糖异构酶基因。

6.根据权利要求5所述的大肠杆菌细胞，其特征在于所述大肠杆菌细胞为包含有重组质粒pal I/pET22b(+)的E.coli BL21(DE3)。

7.一种利用权利要求6所述的大肠杆菌高效表达权利要求1所述基因的方法，其特征在于以糖蜜水解液为诱导剂诱导培养重组大肠杆菌细胞产酶。

8.根据权利要求7所述的高效表达基因的方法，其特征在于将重组大肠杆菌细胞在含有50μg/mL氨苄青霉素的LB液体培养基中30～40℃液体培养8～20h，按2～10(v/v)％的接种量转接至发酵培养基培养5～7h后降温至25～30℃再诱导培养6～12h；所述的发酵培养基为：糖蜜水解液10～50mL/L，(NH₄)₂SO₄ 5～10g/L，NaCl 5～10g/L，KH₂PO₄ 1～3g/L，MgSO₄ 0.1～1g/L。

9.根据权利要求7或8所述的高效表达基因的方法，其特征在于所述的糖蜜水解液按如下方法制备：对于每100mL水，加入20～80g糖蜜溶解，在酸性条件下80～100℃水解1～5h，水解结束后加碱调至中性，即为糖蜜水解液。

10.权利要求6所述的重组大肠杆菌在生物催化生产异麦芽酮糖中的应用。