[发明专利]一种基于酶联免疫法的快速检测系统无效

专利信息
申请号: 201010103698.1 申请日: 2010-02-01
公开(公告)号: CN101769923A 公开(公告)日: 2010-07-07
发明(设计)人: 陶正杰;夏晶 申请(专利权)人: 陶正杰;夏晶
主分类号: G01N33/544 分类号: G01N33/544;G01N33/535;G01N21/31
代理公司: 南京众联专利代理有限公司 32206 代理人: 郭俊玲
地址: 226100江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 免疫 快速 检测 系统
【权利要求书】:

1.一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是包括置于一个检测盒中的以下组件:a、检测构件;b、用于放置目标样品的空瓶;c、装有经冷冻干燥后抗体的试剂瓶;d、装有酶标标记物的试剂瓶;e、装有用于定性的底物的试剂瓶;f、装有用于定量的底物的试剂瓶;g、装有缓冲溶液的试剂瓶。

2.根据权利要求1所述的一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是所述检测构件为包被有抗体的固相载体,所述固相载体套有一个比色杯。

3.根据权利要求2所述的一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是所述固相载体的基质主体为聚羟基丁酸酯,所述基质里还嵌入有带活性功能团的化合物。

4.根据权利要求3所述的一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是所述带活性功能团的化合物为聚氨基酸,所述嵌入的聚氨基酸与聚羟基丁酸酯基质的质量比为(0.1-8)∶100。

5.根据权利要求4所述的一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是所述聚氨基酸为聚天门冬氨酸、聚赖氨酸或聚谷氨酸。

6.根据权利要求3、4或5所述的一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是所述以聚羟基丁酸酯为基质主体的固相载体形状为棒状,即检测棒。

7.根据权利要求6所述的一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是所述检测棒的制备方法为:将聚氨基酸与聚羟基丁酸酯按(0.1-8)∶100的质量比混合均匀后,送入压塑机在110-210℃的加工温度下进行压塑并制成珠粒状,然后再将珠粒状压塑物通过常规工艺制成棒状,即得。

8.根据权利要求1或2所述的一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是所述抗体可为任何种类的免疫球蛋白IgG,所述抗体的包被方法为:首先将抗体以20μg/ml溶于磷酸盐缓冲溶液,将固相载体浸入到抗体溶液中,放入冰箱冷藏过夜;然后取出固相载体,再将其浸入封闭液中,封闭液为溶有体积浓度1%的Tween20的磷酸盐缓冲溶液,室温下静置两小时后,取出自然晾干;固相载体套入比色杯中,2-8℃冷藏保存,所述固相载体为检测棒。

9.根据权利要求1所述的一种基于酶联免疫法的快速检测系统,其特征是所述装有经过冷冻干燥后的抗体的试剂瓶的制备方法为:将抗体以1mg/ml溶于磷酸盐缓冲溶液,取20μl注入试剂瓶中,放入冷冻干燥器中过夜冻干,取出后2-8℃冷藏保存;

所述装有酶标标记物试剂瓶的制备方法为:将1mg金黄色葡萄球菌蛋白A偶联碱性磷酸酶保存于1ml的50×10-3mol/L Tris溶液中,然后再加入氯化镁、氯化锌、牛血清蛋白、甘油和叠氮化钠,使氯化镁达到1.0×10-3mol/L、氯化锌达到0.1×10-3mol/L、牛血清白蛋白的体积浓度达到1%、甘油的体积浓度达到50%和叠氮化钠达到15×10-3mol/L,调pH值为8.0,即得工作浓度为1mg/ml的金黄色葡萄球菌蛋白A偶联碱性磷酸酶;取0.4μl注入试剂瓶中,2-8℃冷藏保存;

所述用于定性测量的底物为5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐(BCIP)与氯化硝基四氮唑蓝(NBT)的混合液,所述装有底物试剂瓶的制备方法为:将摩尔浓度为4.8×10-4mol/L的BCIP和摩尔浓度为5.1×10-4mol/L NBT混合,然后取1ml混合液注入试剂瓶中,2-8℃冷藏并避光保存;

所述用于定量测量的底物为溶于体积浓度为10%的二羟乙基胺的硝基苯磷酸盐,所述硝基苯磷酸盐的质量浓度为1.0mg/ml,所述溶液的pH值为9.5,然后取1ml混合液注入试剂瓶中,2-8℃冷藏并避光保存;

所述装有缓冲溶液试剂瓶的制备方法:将牛血清白蛋白溶于磷酸盐缓冲溶液中使牛血清白蛋白的体积浓度达到1%,然后取5ml注入试剂瓶中,2-8℃冷藏保存即得。

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