[发明专利]具合成头孢菌素酸类酶活性的生物催化剂的制备方法

权利要求书

1.一种具有合成头孢菌素酸类酶活性的生物催化剂的制备方法，包括具有头孢菌素酸合成酶活性的产生菌的培养及固定具有胞内酶活性的成熟细胞，把细胞悬浮在多聚酰胺单体溶液中，随后在引发剂和加速剂作用下形成凝胶。

2.如权利要求1所述的生物催化剂的制备方法，其特征在于具有头孢菌素酸合成酶活性的大肠埃希氏菌菌株是CGMCC No.3508或VKPM B-10182。

3.如权利要求1所述的生物催化剂的制备方法，其特征在于以目标酶在胞内胞外的分配常数K_dist来确定具有头孢菌素酸合成酶活性产生菌培养的终止时间，即发酵液pH7.9-8.2，K_dist≥350时终止头孢菌素酸合成酶的生物合成，发酵停止。

4.如权利要求1所述的生物催化剂的制备方法，其特征在于得到的细菌细胞经戊二醛交联修饰，再按照每克聚合混合物中含100-150mg干细胞量这样的浓度在聚丙烯酰胺单体溶液中反应形成凝胶，从而制得固定化细胞。

5.如权利要求1所述的生物催化剂的制备方法，其特征在于选择优化好的戊二醛浓度及交联时间，菌丝细胞先经戊二醛交联修饰后再悬浮于聚丙烯酰胺凝胶单体溶液中。

6.如权利要求1所述的生物催化剂的制备方法，其特征在于细胞修饰时戊二醛的加入浓度为1×10^-3-9×10^-3mmo1/mg蛋白，细胞的交联修饰在5-30分钟内完成。