[发明专利]吡咯/N-(2-羧乙基)吡咯复合纳米粒子的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于杂环化合物，含有两个或更多的杂环，以氮原子作为仅有的环杂原 子技术领域，具体涉及一种被环原子-环原子的键直接连接的吡咯/N-(2-羧乙基)吡 咯复合纳米粒子。

背景技术

凝血酶是一种重要的生理蛋白酶，在血液凝固、炎症和创伤愈合等生理及病理 过程中发挥重要作用。由于恶性肿瘤患者常有不同程度的出血倾向，肿瘤组织对周 围组织的侵袭、转移的形成以及肿瘤组织和肿瘤患者血液本身的变化，均可导致病 人凝血机制的改变，而凝血酶的浓度及活性作为衡量凝血机制的重要指标，对揭示 肿瘤的发生机制，或作为早期诊断、分子分型、疗效及预后判断具有重大意义。因 此检测凝血酶在医学上有重要意义。传统直接测定凝血酶方法主要有荧光法和发色 底物法。荧光法是用荧光底物标记凝血酶，通过测定荧光强度得出凝血酶的含量， 其中标记步骤较繁琐。发色底物法利用凝血酶切断其与发色肽的作用点，使对硝基 苯胺游离出来，溶液显浅黄色，在405～410nm波长处对光有最大吸收，据此可进行 定量测定，该法简单易行。但两种方法都有一个共同缺点就是灵敏度不高，不宜进 行微量分析，无法适应现代医学要求的痕量检测。

电化学发光分析法具有灵敏度高、线性范围宽、设备简单、操作方便、快速、 易于实现自动化、可控性强、可提供高活性的发光反应物质和节省试剂等特点，已 经应用于环境科学、生命科学和材料科学等领域。在电化学发光分析众多的电化学 发光试剂中，三联吡啶钌Ru(bpy)₃²⁺由于具有水溶性好，化学性能稳定，氧化还原可 逆，发光效率高，应用的pH范围较宽等特点而广泛应用于电化学发光分析的研究中。 但在流动体系的液相电化学发光分析检测应用中，由于昂贵的Ru(bpy)₃²⁺或相关衍 生物作为流动反应试剂被大量消耗，导致较高的分析成本，从而限制了Ru(bpy)₃²⁺的应用。而目前的固定负载方法主要有物理包埋，静电吸附，共价键合等，其中物 理包埋，静电吸附等普遍存在泄漏的问题，共价键合的固定较为牢固，但若固定在一 般块体材料上，固定量不大，若固定在无机纳米材料上，如二氧化硅微球上，由于其 不良的导电性会影响电子的传导，对电化学发光分析目标物产生一定的影响。

聚吡咯类聚合物具有良好的环境稳定性、简易合成、高电导率以及良好的生物相 容性等诸多优点，这些性质赋予其不同于其他导电聚合物的特异性能，成为化学或生 物传感器优先选择的材料之一。尤其是纳米结构的聚吡咯类聚合物拥有特殊的力学、 磁学、热学、光学和电化学活性；而聚吡咯类聚合物纳米化简单，化学氧化聚合和电 氧化聚合均可施行，使其在生物医学工程、临床诊断、环境监测、食品卫生和科学等 领域展现出广阔的应用前景。尤其是将纳米技术引入生物传感器，提高了检测灵敏度、 缩短检测响应时间、延长使用寿命，可实现高通量的实时检测。聚吡咯类聚合物纳米 材料对生物分子进行固定可以提高固载量，对基底电极进行修饰可以提高电催化活 性，从而制备出响应性高、敏感性高、选择性高以及稳定性高的新型纳米生物传感器。 目前将N-(2-羧乙基)吡咯单体(英文名称为1H-Pyrrole-1-propanoic acid)为功能化 试剂与吡咯单体采用化学氧化聚合的方法制备吡咯/N-(2-羧乙基)吡咯复合纳米粒子 并应用于制备凝血酶电化学发光探针的研究尚未见报道。

发明内容

本发明所要解决的一个技术问题在于提供一种操作简便、所制备的产物为纳米 级且粒度均匀的吡咯/N-(2-羧乙基)吡咯复合纳米粒子的制备方法。

本发明所要解决的另一个技术问题在于为吡咯/N-(2-羧乙基)吡咯复合纳米粒 子提供一种用途。

解决上述技术问题所采用的技术方案是它由下述步骤组成：

1、预处理吡咯单体

将市售吡咯在0.02MPa减压蒸馏，收集70～80℃馏分，得到吡咯单体，充氮气 保护，避光保存于4℃冰箱内，备用。

2、化学反应