[发明专利]一种利用高产富硒杂交红米发酵废糟培养桑黄的方法

权利要求书

1.一种利用高产富硒杂交红米发酵废糟培养桑黄的方法，其特征是将桑黄子实体接种至 新鲜的固体斜面上进行培养，待斜面长好后接种至含较低浓度的高产富硒杂交红米 611A/R319发酵废糟的液体培养基中进行种子的培养，即对菌种加以驯化；再接入添加了足 量高产富硒杂交红米611A/R319发酵废糟的液体培养基中进行深层液体发酵培养；由于高产 富硒杂交红米611A/R319发酵废糟中含有丰富的硒、铁、锌微量元素以及糖类和蛋白质，所 以该发酵废糟与桑黄菌的混合发酵液中营养物质丰富；发酵结束后，通过对混合发酵液进行 过滤、烘干、粉碎，得到营养物质含量丰富的桑黄菌丝体粉；步骤为：

1)待用菌种的培养：

出发菌株为桑黄(Phellinus igniarius)；

①斜面培养：

培养基配方以g/L计：马铃薯200、琼脂20、葡萄糖5、硫酸镁2.0、磷酸二氢钾3.0，pH 自然；

培养方法：取桑黄子实体中心部分接种于新鲜的斜面上，在25℃下培养7天左右；

②500mL一级摇瓶种子培养，装液量150mL/500mL：

培养基配方以g/L计：马铃薯200、葡萄糖5、硫酸镁2.0、磷酸二氢钾3.0、维生素B₁ 0.01， pH自然；

培养方法：将培养好的斜面接种至事先灭菌的摇瓶中，在25±1℃下，转速110rpm下培 养7天；

③1000mL二级摇瓶种子培养，装液量400mL/1000mL：

培养基配方：与一级摇瓶种子培养基配方相同；

培养方法：将培养好的一级种子以10％的接种量接种至事先灭菌的摇瓶中，在25℃下， 转速110rpm下培养2天，即成待用菌种；

2)50L一级液体种子培养，装液量25-30L：

①一级液体种子培养基配方以g/L计：葡萄糖5、麸皮50，麸皮水珠后取水溶性麸皮汁、 酵母膏3.0、维生素B₁ 0.01、硫酸镁2.0、磷酸二氢钾3.0、高产富硒杂交红米611A/R319发 酵废糟5，pH自然；

②控制工艺：在0.1Mpa下灭菌30分钟，冷却后按接种量5％-10％接入待用菌种，温 度25±1℃，罐压0.05Mpa，通气量1∶0.3，V/V，搅拌转速100rpm；

③转罐标准：发酵时间30-35小时，菌丝球上浮三分之一，镜检有锁状联合，无杂菌；

3)500L二级液体种子培养，装液量250-300L：

①培养基配方与一级液体种子配方相同；

②控制工艺：在0.1Mpa下灭菌30分钟，冷却后按接种量10％-15％接入一级种子，温 度25±1℃，罐压0.05Mpa，通气量1∶0.3，V/V，搅拌转速100rpm；

③转罐标准：发酵时间30-35小时，菌丝球上浮三分之一，镜检有锁状联合，无杂菌；

4)3000L深层液体发酵培养，装液量1800L：

①发酵培养基配方以g/L计：葡萄糖5、麸皮50，麸皮水煮后取水溶性麸皮汁、酵母膏 3.0、维生素B₁0.01、硫酸镁2.0、磷酸二氢钾3.0、高产富硒杂交红米611A/R319发酵废糟 10，pH自然；

②控制工艺：在0.1Mpa下灭菌30分钟，冷却后按接种量10％-15％接入二级种子，温 度25±1℃，罐压0.05Mpa，通气量1∶0.3，V/V，搅拌转速100rpm；

③放罐标准：发酵时间30-35小时，菌丝球上浮二分之一，镜检有锁状联合，菌丝球不 能自溶；

5)固体发酵物的收集：将培养好的发酵液用5000-6000rpm的离心机处理，收集菌丝体；

6)菌丝体的烘干：将收集的菌丝体用真空干燥箱在50-60℃下烘干；

7)菌丝体的粉碎：用带冷冻的粉碎机将烘干的菌丝体粉碎至80目以上即得产品。