[发明专利]中间苍白杆菌的脂多糖及其作为哺乳动物免疫刺激剂的用途

说明书

本发明涉及从中间苍白杆菌(Ochrobactrum intermedium)菌株LMG3306中分离、纯化和表征脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)，以及其作为哺乳动物免疫刺激剂的用途、制备用于治疗和/预防败血症的药物化合物的方法和用于免疫抑制动物中和对抗利士曼原虫(Leishmania)的疫苗佐剂。

背景技术

苍白杆菌(Ochrobactrum)属的成员包括在变形菌(Proteobacteria)域(domain)的α-2亚群中。它们主要存在于土壤中，已知其仅在病情危重或免疫力低下的患者中或在留置导管的患者中具有致病性。虽然在这些情况下苍白杆菌可引发脑膜炎、骨髓炎、菌血症和败血症，但这些细菌本身不能造成慢性感染，并且在导管去除之后从正常宿主中被清除(Cieslak，T.J.，C.J.Drabick和M.L.Robb.1996.Pyogenic infections due to Ochrobactrum anthropi.Clin.Infect.Dis.22：845-847.)。

因为所有脂多糖(革兰氏阴性细菌外膜的主要成分)的组成遵循一般原则，即其包含通过特异性糖(称为2-酮基-3-脱氧辛酮糖酸(KDO，2-keto-3-deoxyoctulosonic acid))连接至脂质组分(称为脂质A)的多糖(Rietschel，E.T.，Schade，U.，Jensen，M.，Wollenweber，H.W.，Luderitz，O.和Greisman，S.G.1982.Bacterial endotoxins：chemical structure，biological activity and role in septicaemia.Scand.J.Infect.Dis.Suppl.3：8)，因此已假定所有LPS分子都具有相同的生物学效应。

然而，这一观念已经被研究所改变，所述研究显示，几种LPS产生细胞因子合成的能力存在很大差异，该作用与其脂质A部分的结构特征相关(Netea，M.G.，van Deuren，M.，Kullberg，B.J.，Cavaillon，J.M.和van der Meer，J.W.M.2002.Does the shape of lipid A determine the interaction of LPS with Toll-like receptors？Trends Immunol.23：135.)。

嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)是革兰氏阴性的兼性细胞内细菌，就低细胞内毒性和其LPS的化学结构而言，其也类似于布鲁氏菌(Brucella)，并且显著低于肠杆菌的LPS所引起的毒性(Zahhnger，U.，Knirel，Y.A.，Lindner，B.，Helbig，J.H.，Sonesson，A.，Mane，R.和Rietschel，E.T.1995.The lipopolysaccharide of Legionella pneumophila serogroup 1(strain Philadelphia 1)：chemical structure and biological significance.Prog.Clin.Biol.Res.392：113.26)。

人苍白杆菌(Ochrobactrum anthropi)已知与布鲁氏菌亲缘关系最近(Velasco et al.International Journal of Systematic Bacteriology 48(1998)759-768)。尽管其种系进化关联性接近，B.abortus与苍白杆菌在OM特征上显著不同，并且这些广泛的差异至少部分是由LPS中的微小变化所引起的(Velasco等Infection and Immunity 68(2000)3210-3218)。

测定了来自中间苍白杆菌LMG 3301的LPS的完整核心脂质A主链(backbone)和来自人苍白杆菌LMG 3331的LPS的O链(Velasco et al.Carbohydrates Research 306(1996)123-126；Velasco et al.Carbohydrates Research 306(1998)283-290；Velasco et al.Infection and Immunity 68(2000)3210-3218)。