[发明专利]中间苍白杆菌的脂多糖及其作为哺乳动物免疫刺激剂的用途

权利要求书

1.一种来自中间苍白杆菌(Ochrobactrum intermedium)LMG3306的脂多糖，其能在哺乳动物中激发免疫应答，用于治疗和/或预防败血症。

2.用于制备权利要求1的脂多糖的方法，其包括用胰酪胨大豆肉汤培养来自中间苍白杆菌菌株LMG 3306的细菌

3.根据权利要求2的方法，还包括按以下步骤提取所述脂多糖：

a)将中间苍白杆菌LMG3306的灭活培养物离心；

b)将所获得的沉淀物重悬在盐水悬浮液中；

c)用纯水和聚乙二醇透析；

d)用四体积的甲醇和1％的醋酸钠饱和甲醇沉淀；和

e)冷冻干燥以获得粗制LPS。

4.根据权利要求2的方法，还包括按以下步骤纯化粗制LPS：

a)在缓冲液(10mM Tris-HCI pH 7.5)中溶解粗制LPS，任选地以超声辅助；

b)添加蛋白酶K并在室温下孵育；

c)通过超速离心收集纯化的LPS；和

d)冷冻干燥该样品。

5.一种免疫刺激剂组合物，其包含权利要求1的来自中间苍白杆菌LMG3306的脂多糖和任选地一种或多种药学上可接受的赋形剂。

6.根据权利要求5的组合物，其特征在于，其包含化学纯的中间苍白杆菌LMG 3306的LPS，其中非溶剂组分未被超过0.2％的其他化合物所污染。

7.根据权利要求5～6中任一项的组合物，其特征在于，其包含0.5～120μg/ml的来自中间苍白杆菌菌株LMG3306的LPS。

8.根据权利要求5～7中任一项的组合物，其中所述脂多糖处于均匀的悬浮液中，其中胶束相在4℃下稳定超过1年。

9.根据权利要求5～8中任一项的组合物，其中所述组合物的pH在2～12之间。

10.根据权利要求5～9中任一项的组合物在制备用于调节哺乳动物免疫应答的药物中的用途。

11.根据权利要求10的用途，其中所述调节包括在所述哺乳动物中增强免疫活性。

12.根据权利要求11的用途，其中所述免疫应答调节在于诱导巨噬细胞分化、产生TNF、产生IL-12、脾淋巴细胞产生IFN-γ和/或刺激病毒特异性的CD8和CD4T细胞。

13.根据权利要求11的用途，其中所述调节包括在所述对象中抑制促炎细胞因子的产生。

14.权利要求13的用途，其中所述促炎细胞因子为IL-12。

15.根据权利要求5～9中任一项的组合物作为疫苗佐剂用于改进对抗所述疫苗中所含有的特异性病毒和/或细菌之免疫的用途。

16.根据权利要求5～9中任一项的组合物在制备用于治疗和/或预防败血症的药物中的用途。

17.根据权利要求5～9中任一项的组合物在制备用于治疗和/或预防内毒素血症的药物中的用途。

18.根据权利要求5～9中任一项的组合物在制备用于治疗和/或预防感染性疾病的药物中的用途。

19.根据权利要求18的组合物在制备用于在免疫抑制的动物中治疗和/或预防感染的药物中的用途。

20.根据权利要求18～19中任一项的组合物作为用于对抗利什曼原虫感染之疫苗佐剂的用途。

21.根据权利要求20的组合物作为用于对抗利什曼原虫皮肤感染之疫苗佐剂的用途。