[发明专利]对血红蛋白测量的颗粒干扰的校正的方法

说明书

相关申请的交叉引用

该申请是要求在2008年11月13日提交的美国第61/114,294号临时申请的利益的非临时申请，通过引用将其全部结合于此。

技术领域

本发明涉及血液样品的血红蛋白测量，更具体地，涉及在自动的血液分析仪上对血红蛋白测量的颗粒干扰的校正的方法。

背景技术

总的血红蛋白浓度的确定指示全血的氧气携带能力。依据具有临床症状的病人的检查并且通过临床上正常的种群的电泳调查，已经发现300个以上的异常血红蛋白。许多这些异常引起已经改变血红蛋白水平的临床病理学或者具有凝固氧气的改变能力的血红蛋白。

配备商业的血液分析仪以测量和报告血液样品的血红蛋白浓度。在大部分血液分析仪上，测量血液样品的血红蛋白浓度的过程包含使血液样品中的红细胞溶解并且形成样品混合物中的血红蛋白色原、以预定波长测量样品混合物的分光光度的吸光度、并且报告血液样品的总的血红蛋白浓度。

在用于测量血红蛋白浓度的样品混合物中，红细胞被溶解以释放血红蛋白分子，诸如白细胞、有核红细胞以及血小板的其它细胞颗粒余留在样品混合物中，尽管它们可能受损伤或者尺寸缩小。已知的是，因为细胞颗粒吸收并且散射测量中使用的入射光，所以存在于样品混合物中的这些细胞颗粒干扰血红蛋白的分光光度测量。在正常的血液样品中，白细胞浓度典型的是从4×10³/μL到9×10³/μL，并且血小板浓度典型的是从200×10³/μL到400×10³/μL。然而，在一些病理学的条件下，例如，严重的脂血或者蛋白血，白细胞浓度可以高于20×10³/μL，并且血小板浓度可以高于700×10³/μL。在一些白细胞增多样品中，白细胞浓度基本上可以高于100×10³/μL。用于血红蛋白测量的样品混合物中的这些细胞颗粒可能导致血红蛋白浓度的显著的估计过高。颗粒干扰还已经与具有大量血红蛋白以及严重的小红细胞症/血红蛋白过少的血液样品相冲突。

当前的许多方法被用于防止或者校正细胞颗粒对血红蛋白测量的干扰。在临床以及实验室标准化学会(以前的NCCLS)人工的参考方法中，当样品混合物在750纳米的吸光度≥0.003时，或者当吸光度比值(在540纳米的吸光度与在504纳米的吸光度相比)＜1.59时，需要经由0.22μm的过滤器过滤样品混合物，以去除颗粒。

在临床诊断实验室中的一般惯例，作为经常由血液分析仪制造商推荐的，在血液分析仪报告异常高的白细胞浓度之后，再次利用预稀释来分析血液样品，以确定血红蛋白浓度。在这个过程中，血液样品被食盐水稀释，或者被在血液分析仪上使用的稀释剂所稀释从而降低颗粒的浓度，例如，把白细胞浓度降低到低于20×10³/μL或者制造商推荐的水平。然后，在仪器上再次分析预稀释的样品以测量血红蛋白。考虑稀释剂，从预稀释的样品获得的血红蛋白浓度被用于计算血液样品的血红蛋白浓度。这个方法具有许多缺点。血液样品必需在仪器上被分析两次。它消耗时间并且需要通过操作者人工的制备。该预稀释引入起源于吸管吸入血液和稀释剂的其他的误差，并且在稀释之前和之后，人工地混合血液。此外，对于具有低血红蛋白浓度的血液样品，进一步的稀释降低了血红蛋白测量的准确度。

另一个已知的校正对血红蛋白测量的颗粒干扰的方法是，以两个不同的波长测量样品混合物的吸光度。第一波长是在可见区中，例如在540纳米，被用于测量血红蛋白色原。第二波长是在红外线区，例如在800纳米，从而测量由细胞颗粒引起的混浊度。在第二波长的吸光度被用于校正在第一波长的测量，从而产生校正的血红蛋白浓度。使用这个方法的手持装置，以商品名Hemocue Hb 201⁺为代表，可在市场上从希曼AB公司(HemoCue AB)(瑞典恩厄尔霍尔姆市)获得。这个装置只是用于测量血红蛋白，而不是其它血液学参数。在一些血液学实验室中，特别是在欧洲，在血液样品已经在血液分析仪上被分析和被报告具有异常高的白细胞浓度之后，然后Hemocue Hb 201⁺被用于测量和报告血红蛋白浓度。

因此，需要一种方法，特别在自动的血液分析仪上的自动的处理，从而校正细胞颗粒对血红蛋白浓度的测量的干扰。

发明内容