[发明专利]提供对疟原虫的长效免疫应答的用于疟疾的多组分疫苗

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求享有2008年10月1日提交的美国临时申请No.61/101,944和2008年11月7日提交的美国临时申请No.61/112,572的权益，每件申请都以引用的方式全文纳入本文。

技术领域

本发明公开了用于在受试者中激发对疟原虫(Plasmodium)的免疫应答并且保护受试者不受疟原虫感染的免疫原性缀合物。

背景技术

疟疾可归为全球三大致命疾病之一(每年约3亿病例)。恶性疟原虫(P.falciparum)可导致最严重的形式，每年导致约一百万人死亡(其中90％是幼儿)。

感染开始于蚊子将疟疾子孢子注入至宿主血流之时。在注射后，它们迁移到肝脏并在肝细胞中繁殖一至两周。子孢子分化为裂殖子，裂殖子从肝脏释放进入血流，而它们在血液中感染红细胞。当裂殖子在红细胞中成熟时，它被称为滋养体，并且当完全发育后成为裂殖体。裂殖体阶段出现核分裂以形成单个裂殖子，所述裂殖子被释放以侵入其他红细胞。在数个裂体生殖周期后，一些寄生虫不再通过无性生殖形成裂殖体，而是发育为大单核寄生虫。这些寄生虫发生性发育。

疟原虫的性发育涉及雌性大配子母细胞和雄性小配子细胞。如果蚊子摄食感染宿主的血液，它将摄入血液中的配子母细胞。在蚊子的消化道中发生寄生虫的受精和性结合。随后，被称为接合子的受精寄生虫发育为动合子。动合子穿透蚊子的中肠壁并发育为囊合子，其中形成许多小子孢子。当囊合子破裂时，子孢子经血淋巴迁移至蚊子的唾液腺。一旦寄生虫在蚊子的唾液中，其就能被注入至宿主，重复生命周期。

还没有疫苗，并且疟原虫正在日益变得对已经用于治疗所述疾病数十载的抗疟药具有抗性。

发明内容

本发明公开了可激发针对疟原虫蛋白的免疫应答的免疫原性缀合物。在具体的实例中，所述疟原虫蛋白包括有性阶段表面蛋白(如P25、P28、P48/45或P230)、无性环子孢子蛋白(CSP)或其免疫原性部分。本文提供了免疫原性缀合物，所述免疫原性缀合物包括与至少一种疟原虫环子孢子蛋白(CSP)或CSP的免疫原性部分共价连接的至少一种疟原虫有性阶段表面蛋白(例如，P25、P28、P48/45或P230)。所述蛋白或肽通过如非肽接头(如酰胺键、腙键或硫醚键)或通过肽接头(如约1至12个肽键)共价连接。在具体的实例中，所述免疫原性缀合物包括与至少一种CSP共价连接的至少一种有性阶段表面蛋白Pfs25或Pvs25(例如，至少1、2、3、4或5种Pfs25或Pvs25蛋白)。在另外的实例中，所述免疫原性缀合物包括与至少一种来自疟原虫CSP的免疫原性重复共价连接的至少一种有性阶段表面蛋白(如P25、P28、P48/45或P230)，所述免疫原性重复例如至少一种Asn-Ala-Asn-Pro(NANP)(SEQ ID NO：1)重复、至少一种Asn-Pro-Asn-Ala(NPNA)(SEQ ID NO：2)重复、至少一种Pro-Asn-Ala-Asn(PNAN)(SEQ ID NO：3)重复、至少一种Ala-Asn-Pro-Asn(ANPN)(SEQ ID NO：4)重复或者其两种或多种的结合物。

本发明还提供了免疫原性缀合物，所述免疫原性缀合物包括具有至少一种来自疟原虫CSP的免疫原性重复的肽，所述重复例如与至少一种其他免疫原性蛋白(如非疟原虫蛋白的免疫原性蛋白，如激发免疫应答的蛋白，例如细菌毒素)共价连接的至少一种NPNA(SEQ ID NO：2)重复、至少一种PNAN(SEQ ID NO：3)重复或至少一种ANPN(SEQ ID NO：4)重复。所述蛋白或肽通过例如非肽接头(linker)(如酰胺键、腙键或硫醚键)或通过肽接头(如约1至12个肽键或氨基酸)共价连接。

本发明还提供了包括具有疟原虫T细胞表位(如来自CSP的T细胞表位)和与至少一种其他免疫蛋白(如非疟原虫蛋白的免疫原性蛋白，如可激发免疫应答的人病原体蛋白，如细菌毒素)共价连接的至少4种CSP免疫原性重复(例如，NANP(SEQ ID NO：1)、NPNA(SEQ ID NO：2)、PNAN(SEQ ID NO：3)或ANPN(SEQ ID NO：4)重复)的肽的免疫原性缀合物。所述蛋白通过例如非肽接头(如酰胺键、腙键或硫醚键)或通过肽接头(如约1至12个肽键)共价连接。