[发明专利]用于DNA测序和其他用途的膜集成病毒DNA包装马达蛋白连接器生物传感器

权利要求书

1.一种含导电通道膜，包括：

(a)膜层；和

(b)分离的病毒DNA包装马达连接器蛋白，所述分离的病毒DNA包装马达连接器蛋白嵌入到所述膜层以形成孔道，外加跨膜电势时可以经过所述孔道导电。

2.根据权利要求1所述的含导电通道膜，其中所述病毒DNA包装马达连接器蛋白是人造的。

3.根据权利要求1所述的含导电通道膜，其中所述病毒DNA包装马达连接器蛋白包含病毒DNA包装马达连接器蛋白多肽亚基的均十二聚体，其中所述亚基中的每个包含：

(a)孔道结构域，所述孔道结构域包含分离的病毒连接器蛋白多肽，所述分离的病毒连接器蛋白多肽含有氨基端和羧基端；以及

(b)以下两者之一或全部：

(i)至少一个柔性结构域，所述至少一个柔性结构域包括具有4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18个连续的不带电氨基酸的多肽，并融合至(a)中所述氨基端或所述羧基端中的至少一个，以及

(ii)至少一个亲和/对齐结构域。

4.根据权利要求1所述的含导电通道膜，其中所述病毒DNA包装马达连接器蛋白包含病毒DNA包装马达连接器蛋白多肽亚基的均十二聚体，其中所述亚基中的每个包含：

(a)孔道结构域，所述孔道结构域包含分离的病毒连接器蛋白多肽，所述分离的病毒连接器蛋白多肽含有氨基端和羧基端；以及

(b)以下两者之一或全部：

(i)至少一个柔性结构域，所述至少一个柔性结构域包括具有4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个连续的不带电氨基酸的多肽，并融合至(a)中所述氨基端和所述羧基端中的至少一个，以及

(ii)至少一个亲和/对齐结构域，所述至少一个亲和/对齐结构域包含式X_1a-X_1a-X_2a-X_1b-X_1b-X_1b-X₃-X_2b的多肽并融合至所述柔性结构域，其中每个X_1a独立地是任何不带电的氨基酸或无氨基酸，每个X_1b独立地是任何不带电的氨基酸，X_2a是选自赖氨酸、精氨酸和组氨酸的带正电的氨基酸，X₃是选自谷氨酸和天门冬氨酸的带负电的氨基酸，以及X_2b是选自赖氨酸、精氨酸和组氨酸的带正电的氨基酸。

5.根据权利要求1所述的含导电通道膜，其中所述病毒DNA包装马达连接器蛋白包含病毒DNA包装马达连接器蛋白多肽亚基的均十二聚体，其中所述亚基中的每个包含：

(a)孔道结构域，所述孔道结构域包含分离的病毒连接器蛋白多肽，所述分离的病毒连接器蛋白多肽含有氨基端和羧基端；以及

(b)以下两者之一或全部：

(i)至少一个柔性结构域，所述至少一个柔性结构域包含如SEQ ID NO：23所示的多肽序列Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Gly并融合至(a)中的所述羧基端，以及

(ii)至少一个亲和/对齐结构域，所述至少一个亲和/对齐结构域融合至所述柔性结构域。

6.根据权利要求3或权利要求5所述的含导电通道膜，其中所述亲和/对齐结构域选自：

(i)如SEQ ID NO：22[WSHPQRFEK]所示的Strep-II标签，

(ii)具有3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个连续组氨酸的多组氨酸多肽标签，

(iii)具有3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个连续精氨酸的多精氨酸多肽，

(vi)HIV Tat多肽序列YGRKKRRQRR[SEQ IDNO：39]，和

(v)序列为DRATPY的多肽标签[SEQ ID NO：40]。