[发明专利]抑制与FGFR4相关的癌细胞侵袭的材料和方法

说明书

与相关申请的交叉参考

本申请要求2008年9月3日提交的美国临时专利申请No.61/093,925和2009年3月2日提交的美国临时专利申请No.61/156,634的优先权。

技术领域

总的来说，本发明涉及癌症治疗，还涉及与成纤维细胞生长因子受体-4(FGFR4)结合的抗体和抗体片段及其使用，以及包含它们的组合疗法。

发明背景

肿瘤细胞侵袭在癌症病理发生中扮演重要角色。癌细胞穿过底层基底膜的侵入以及向远处器官的转移，被认为是癌发生和癌扩散中的限速步骤。在这些过程中，肿瘤细胞依靠细胞表面上的定向蛋白水解活性穿过基底膜屏障，并侵入富含胶原蛋白或纤维蛋白的间质和临时基质(temporary matrixes)并在其中生长。继发肿瘤在身体远处区域的形成使治疗选择复杂化，并经常在癌症患者中产生不良临床结果。

当前的癌症治疗策略聚焦于通过促凋亡、抗增殖和抗血管生成疗法阻断肿瘤生长。例如，已经提出生长因子受体例如成纤维细胞生长因子受体作为抑制增殖的可能的靶。参见例如St.Bernard等，Endocrinology，146(3)：1145-1153(2005)。生长因子受体信号传导的可能调节物包括例如小分子、失活配体和抗体。Kwabi-Addo等，Endocrine-Related Cancer，11：709-724(2004)。例如，Chen等，Hybridoma，24(3)：152-159(2005)，据称鉴定了与人类乳腺癌肿瘤细胞系上的FGFR4结合的抗体。但是，抑制肿瘤侵袭的尝试还没有成功。因此，开发靶向细胞侵袭的新的干预方法，对于更有效的癌症治疗来说是极为重要的。

发明概述

总的来说，本发明涉及可用于治疗肿瘤性疾病例如癌症的的材料，包括抗体物质、核酸、多肽和组合物。本发明还涉及使用这些材料的方法，包括治疗方法、医疗应用和制造药物组合物的应用。本发明还涉及用于筛选新疗法和新组合疗法的工具。

本发明提供了分离的抗体或抗体片段，其(i)与哺乳动物细胞表达的成纤维细胞生长因子受体-4(FGFR4)的细胞外表位结合，并且(ii)抑制癌细胞侵袭。此外，本发明提供了单克隆抗体F90-10C5，以及包含单克隆抗体F90-10C5的一个或多个、优选所有互补决定区(CDR)并与哺乳动物细胞中表达的FGFR4的细胞外表位结合的分离的抗体、抗体片段或多肽。另一方面，本发明提供了与FGFR4被单克隆抗体F90-10C5结合的表位相结合的分离的抗体例如单克隆抗体或其片段。抗体所识别的FGFR4可以包含FGFR4 G388蛋白或FGFR4 R388变体的氨基酸序列。包含抗体、其片段或多肽并任选与其他治疗物和/或可药用载体、赋形剂、佐剂等组合的组合物，也包括在本发明中。

本发明还提供了用于制造所要求权利的抗体或其片段的材料和方法。例如，本发明提供了编码本发明的抗体或其片段的分离的多核苷酸、包含该多核苷酸的载体、包含该多核苷酸或载体的分离的宿主细胞以及杂交瘤。本发明还提供了分离的多核苷酸，其包含编码选自抗体重链可变区和抗体轻链可变区的至少一个氨基酸序列的核苷酸序列。重链可变区和轻链可变区包含与单克隆抗体F90-10C5的互补决定区(CDR)相同的CDR。本发明还提供了鉴定抗体或抗体片段的方法。方法包含获得与FGFR4结合的一个或多个抗体或抗体片段；在肿瘤细胞侵袭力分析中筛选抗体或抗体片段；以及鉴定在所述分析中将侵袭力抑制至少50％的抗体。

本发明还包括使用本发明的抗体或其片段的方法。例如，提供了调节癌细胞的侵袭、向内生长或转移的方法。方法包含将癌细胞群体与含有本发明的抗体或其片段的组合物相接触，所述组合物的量能够有效调节癌细胞的侵袭、向内生长(ingrowth)或转移。方法可以在体内进行，这种情况下癌细胞是在哺乳动物对象中，并且接触步骤包含向哺乳动物对象给药组合物。