[发明专利]促进肾前体细胞增殖的方法无效
| 申请号: | 200980128520.8 | 申请日: | 2009-06-16 |
| 公开(公告)号: | CN102171332A | 公开(公告)日: | 2011-08-31 |
| 发明(设计)人: | A·J·维斯图沃;M·斯泽克兹普卡;E·特泽姆帕兹斯 | 申请(专利权)人: | 创新生物制剂疗法公司;塞托弗尔克斯股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/06 |
| 代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 刘晓东 |
| 地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 促进 体细胞 增殖 方法 | ||
1.促进来自肾脏样品的细胞增殖的方法,所述方法包括促进来自所述样品的肾脏前体细胞扩充,从而促进来自所述样品的细胞群的增殖。
2.权利要求1的方法,其中所述方法使前体细胞保持在未分化状态。
3.权利要求1的方法,其中所述方法使前体细胞的数目相对于样品中所存在的数目而言有所增加。
4.权利要求1的方法,其中所述方法包括对样品中的细胞进行稀释。
5.权利要求1的方法,其中被促进增殖的细胞群包含肾细胞。
6.权利要求1的方法,其中所述方法保留了非贴壁细胞。
7.权利要求1的方法,进一步包括施加视黄酸。
8.权利要求1的方法,所述方法包括应用刺激前体细胞的条件。
9.权利要求1的方法,所述方法包括应用扩增前体细胞的条件。
10.用于增殖来自肾脏样品的肾细胞的方法,所述方法包括:(a)处理肾脏样品以产生大小约212微米或更小的组织片段;(b)以大于约50x(g)的离心力离心收获所述组织片段的至少一部分,以产生沉淀浆状物;(c)将步骤(b)中所产生的沉淀浆状物的一部分物施加至固相支持物上,并在缺乏视黄酸和允许肾细胞附着于固相支持物上并分裂的条件下培养来自该沉淀浆状物的细胞;(d)在细胞于固相支持物上达到汇合之前收获步骤(c)中所产生的细胞;(e)将步骤(d)中收获的一部分细胞施加至固相支持物上并在缺乏视黄酸和允许肾细胞附着于固相支持物上并分裂的条件下对所述细胞进行传代培养;以及(f)收获步骤(e)中产生的细胞以生产经增殖的肾细胞群。
11.权利要求10的方法,其中在更换培养或传代培养的生长培养基时保留非贴壁细胞。
12.促进来自样品的细胞增殖的方法,所述方法包括:将样品分散成大小约212微米或更小的片段以产生浆状物;以大于约50x(g)的离心力离心该浆状物,产生沉淀浆状物;以培养物待生长的表面上每平方厘米表面面积约10μl或更少的沉淀浆状物的量将沉淀浆状物施加到生长表面上进行培养;并且以传代培养物待生长的表面上每平方厘米表面面积有来自该培养物的约8.7x104个或更少的细胞进行传代培养。
13.权利要求12的方法,进一步包括在传代培养步骤之后加入视黄酸。
14.权利要求12的方法,其中所述样品是肾脏样品。
15.权利要求12的方法,其中在更换培养或传代培养的生长培养基时保留非贴壁细胞。
16.权利要求12的方法,其中所述传代培养步骤在细胞汇合之前进行。
17.权利要求12的方法,其中还包括以进一步的传代培养物待生长的表面上每平方厘米表面面积有来自该传代培养物的约8.7x104个或更少的细胞进行传代培养。
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