[发明专利]高容量固相

权利要求书

1.利用包括以下依次步骤的方法制备的高容量固相：

a)在两性离子添加剂的存在下，用分析物-特异性生物分子包被固体载体，其中所述的生物分子包含SH-基团，

b)孵育固体载体充足时间，以将所述生物分子固定至所述固体载体，以及

c)干燥所述固体载体。

2.根据权利要求1的固相，其中所述方法还包括以下步骤：

d)用非相互作用成分饱和固体载体上的非特异性结合位点。

3.根据权利要求1或2中任一项的固相，其中所述分析物-特异性生物分子选自蛋白质、抗体、抗体片段、抗原、受体配体、蛋白质受体、特异性结合蛋白质、适体、核酸、寡核苷酸和肽。

4.根据上述权利要求中任一项的固相，其中所述分析物-特异性生物分子为链亲和素。

5.根据上述权利要求中任一项的固相，其中所述的生物分子已经经硫醇化作用修饰引入SH-基团，所用硫醇化试剂选自S-乙酰基巯基乙酸(SATA)、3-(2-吡啶基二硫基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)、N-琥珀酰亚胺基-S-乙酰基巯基丙酸酯(SADP)、琥珀酰亚胺基氧基羰基-α-甲基-α-(2-吡啶基二硫基)甲苯(SMPT)和2-亚胺基硫杂环戊烷(Traut试剂)。

6.根据上述权利要求中任一项的固相，其中所述两性离子添加剂具有以下基本结构：

A’-R-A”

其中，

A’选自

其中R₁、R₂和R₃独立地为氢、卤素、-NO₂、-CN、-OR⁴、-SR⁴、-SO₂R⁴、-SOR⁴、C_1-6-烷基、C_1-6-多氟烷基、C_2-6-烯基、C_2-6-炔基、C_3-6-环烷基、C_2-6-烷氧基烷基、C_2-6-烷基硫烷基、C_2-6-烷基氨基烷基、其中R⁴为氢或C_1-6-烷基，

R为式-(CH₂)_m-的烷基链，且m＝0-22，以及

A”选自-O^-、-CO₂^-、-OSO₃^-、-OPO₃^2-和-OPO₃H^-。

7.根据权利要求6的固相，其中R₁、R₂和R₃独立地为氢，或相同的或不同的式CH₃-(CH₂)_n-表示的烷基基团，且n＝0-5。

8.根据上述权利要求中任一项的固相，其中所述包被步骤通过以下包被方法进行：点分配包被、固体针印刷和喷墨印刷。

9.根据上述权利要求中任一项的高容量固相在用于固相检测样品中的分析物的方法中的用途，所述方法包括以下步骤：

a)将待检测分析物含量的样品加入根据权利要求1-8中任一项的高容量固相，以及

b)测量分析物的存在或其浓度。

10.根据权利要求9的用途，其中通过检测存在于分析物上、生物分子的配偶体上或结合至分析物的第二生物分子上的标记物测量所述分析物。

11.根据权利要求9和10中任一项的用途，其中所述分析物连接至所述生物分子的结合配偶体。

12.根据权利要求11的用途，其中结合配偶体为生物素且所述生物分子选自亲和素和链亲和素。

13.根据权利要求11的用途，其中所述生物分子为抗原特异性的抗体或抗体片段，所述抗原为结合配偶体。

14.制备高容量固相的方法，其中所述方法包括以下依次步骤：

a)在两性离子添加剂的存在下，用分析物-特异性生物分子包被固体载体，其中所述的生物分子包含SH-基团，

b)孵育固体载体充足时间，以将所述生物分子固定至所述固体载体，以及

c)干燥所述固体载体。