[发明专利]用于递送光敏蛋白的载体和使用方法

说明书

交叉引用

本申请要求以下美国临时申请的权益：2008年5月20日提交的第61/054,571号、2008年11月14日提交的第61/199,241号，2008年11月26日提交的第61/200,430号，通过引用将上述申请全部并入本文。

背景技术

用来治疗疾病或障碍的基因递送疗法，其不依赖于治疗潜在的突变，可能具有潜在的价值。能够控制、调节和/或驱动特异性神经回路从而介导自然神经响应和高分辨率感知以及控制的方法也可能具有巨大的潜在治疗价值。神经元是使用通过去极化形成的电流以产生通信信号(例如神经脉冲)的细胞类型的实例。其他可电兴奋的细胞包括骨骼肌细胞、心肌细胞和内分泌细胞。神经元利用快速去极化来在全身传输信号，并且用于各种目的，例如运动控制(例如肌肉收缩)、感官反应(例如触觉、听觉和其他感觉)以及计算功能(例如脑功能)。通过促进或抑制阳离子或阴离子流经细胞膜，细胞可被暂时去极化、去极化且维持此状态或者超极化。因而，细胞的去极化控制对于许多不同的目的可能是有益的，所述细胞的去极化控制包括视觉控制、肌肉控制和感官控制。光敏蛋白通道、泵和受体可以允许细胞的毫秒精确的光学控制。虽然光敏蛋白与光结合可以用于控制离子经由细胞膜的流动，但对于特定的疾病、障碍和回路，靶向和递送仍然尚待解决。

发明内容

一方面，本发明提供重组核酸，其包含可操作地连接至代谢型谷氨酸受体6(mGluR6)调控序列或其片段的编码光敏蛋白的核酸。在一种实施方式中，所述光敏蛋白可以选自：ChR1、ChR2、VChR1、ChR2C128A、ChR2 C128S、ChR2 C128T、ChR1-ChR2杂合体/嵌合体、ChD、ChEF、ChF、ChIEF、NpHR、eNpHR、黑视蛋白(melanopsin)以及它们的变体。在另一实施方式中，所述光敏蛋白为ChR2，或者为与ChR2至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约95％相同的光敏蛋白。在另一实施方式中，所述mGluR6调控序列片段包含少于约1000个、少于约750个、少于约500个、少于约250个或者少于约100个碱基对。在相关的实施方式中，所述mGluR6调控序列或其片段为mGluR6启动子或者增强子。在特别相关的实施方式中，所述核酸还包含绿色荧光蛋白。在另一实施方式中，所述核酸被包裹在重组腺相关病毒(AAV)的衣壳中。在一些实施方式中，所述重组AAV的血清型为2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或更多个血清型或者它们的突变体的组合杂合体。在一些实施方式中，所述重组腺相关病毒的血清型选自：AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12以及它们的杂合体。在相关的实施方式中，所述核酸衣被包裹在选自以下的重组病毒的衣壳中：重组腺相关病毒(AAV)、重组逆转录病毒、重组慢病毒和重组痘病毒。