[发明专利]累积的时间分辨发射双向凝胶电泳

权利要求书

1.一种双向凝胶电泳图像获取的改进方法，所述方法包括用脉冲激光扫描仪激发与蛋白质结合的荧光染料以便提供逐个像素水平上的荧光寿命成像测定。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述脉冲激光扫描仪是在密封的扫描仪外壳之内进行内部封装的二极管激光器。

3.如权利要求1所述的方法，其中，所述脉冲激光扫描仪通过光缆出口在外部附着以提供使用的激发波长的最佳灵活性。

4.如权利要求1所述的方法，其中，所述方法在改进的现有仪器上进行。

5.如权利要求1所述的方法，其中，所述方法是在完全封闭的扫描系统上进行。

6.如权利要求1所述的方法，进一步包括利用荧光衰减曲线的多指数拟合来分离来源于荧光染料标记的蛋白质种类的荧光和来源于其他来源例如凝胶基质本身、溶液或存在于凝胶中的微粒，或散射效应的荧光，用于随后的背景减除。

7.如权利要求1所述的方法，进一步包括连续使用激发的多激光器波长以促进时间分辨荧光与荧光染料的光谱分离的组合，采用通过光谱分离的复用技术以降低寿命衰减光谱的复杂性。

8.如权利要求7所述的方法，其中，用双荧光寿命成像测定。

9.如权利要求1所述的方法，进一步包括将荧光染料特异性的强度荧光衰减曲线积分以计算曲线下面积。

10.如权利要求1所述的方法，进一步包括将自动化特征和用户容易使用的特征合并。

11.如权利要求10所述的方法，其中，所述自动化特征和用户容易使用的特征包括：获得的单向或双向凝胶电泳的图解算法和定量算法中的至少一种、用于荧光寿命成像分析的自动化方案、背景组分的减除和在双向凝胶电泳中使用的标准荧光染料的荧光染料组分的强度图像的输出。

12.如权利要求1所述的方法，进一步包括将自动化最大化，便于由用户定义的多种不同方案的顺序扫描程序，包括用于复用的多种荧光染料的顺序扫描。

13.如权利要求1所述的方法，进一步包括使用在基于凝胶的蛋白质组学中使用的荧光探针和用于优化扫描时间的变频脉冲激光二极管。