[发明专利]脂笼蛋白-2作为心脏和中风风险的预后和诊断标记

说明书

发明背景

发明领域

本发明涉及脂笼蛋白-2(lipocalin-2)作为心脏风险、慢性心脏病和中风风险的诊断标记的用途。具体地说，本发明涉及通过测量受试者循环脂笼蛋白-2的浓度并与标准化的人群或标准人群的脂笼蛋白-2水平比较所测量的水平，来评估风险和这些风险的发展。

背景

心血管病在发达国家仍然是最普遍的发病和死亡的原因。因此，预防心血管病是主要的公共卫生重要领域。目前业已阐述未来心血管病的若干风险因子，并在临床上广泛用于检测高风险个体，例如评估总胆固醇、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)水平。然而，大量心血管病发生在明显具有低到中等风险概况(risk profile)的个体中，鉴定所述患者的能力受到限制。此外，积累的数据提示，某些预防性及治疗性治疗对处于心血管病风险中或已知患有心血管病的患者的有益作用，在不同患者群中变化极大。然而，目前缺乏阐述确定是否可预期某些治疗更有效或更无效的诊断测定的数据。

脂笼蛋白-2也被称为24p3(1)和中性粒细胞明胶酶相关脂笼蛋白(NGAL)(2)，是25kDa的分泌性糖蛋白，其最初在小鼠肾细胞和人嗜中性粒细胞颗粒中鉴定。其属于由超过20个分泌性小蛋白组成的脂笼蛋白超家族，所述小蛋白包括RBP4、脂肪酸结合蛋白(FABP)、主要尿蛋白(MUP)、载脂蛋白D(apoD)和前列腺素D合成酶(PGDS)(3)。该蛋白家族的共同特征是其结合并运输诸如游离脂肪酸、类视黄醇、花生四烯酸和各种类固醇(4)等小亲脂物质的能力。尽管先前业已报道脂笼蛋白-2与白细胞三烯B₄及脂多糖(5)有微弱结合，但仍有待鉴定其高亲和力的内源配体。脂笼蛋白-2除在嗜中性粒细胞中表达之外，还在若干其它组织中表达，包括肝、肺、肾、脂肪细胞和巨噬细胞(6-8)。诸如脂多糖和“IL-1β”等几种炎性刺激物可在这些细胞中显著诱导脂笼蛋白-2表达及分泌(6，9)。显而易见的是，业已显示促炎转录因子NF-κB通过与在脂笼蛋白-2基因启动子区内的共有基序结合来反式激活(transactivate)脂笼蛋白-2表达(10)，这表明该分泌性蛋白质可能参与炎性反应。

最近发现升高的血浆脂笼蛋白-2水平与动脉粥样硬化病变中增加的蛋白水解活性有关，并表明其为缺血性损伤、顺铂中毒性肾损害或感染后的肾衰竭的起因(11-15)。脂笼蛋白-2与基质金属肽酶9(MMCN9)的部分结合表明，脂笼蛋白-2可通过保护MMCN9免遭降解(2，16)并保留其酶活性而对MMCN9发挥调节作用。最近的研究表明，MMCN9和脂笼蛋白-2共同位于人动脉粥样硬化斑的巨噬细胞及光滑肌肉细胞(SMC)中。原位淋巴造影术(zymphography)显示脂笼蛋白-2表达得越多的地方，MMCN9活性越高，这表明脂笼蛋白-2在调节MMCN9活性及破坏硬化斑的稳定中的潜在作用(15)。

发明简述

本发明实施方案涉及通过免疫测定或免疫试验来测量体液(包括但不限于血液、血清、血浆、尿液、唾液、泪液等)中的脂笼蛋白-2，以用于：(1)预测未来心血管病的风险；和(2)测定某些个体自使用设计为预防和/或治疗心血管病的某些治疗中获得较大或较小程度的益处的可能性。

业已发现脂笼蛋白-2水平升高预示未来心血管病。例如，明显健康的人脂笼蛋白-2水平升高预示心肌梗塞(MI)风险增加。作为另一实例，脂笼蛋白-2水平升高预示未来中风的可能性增加。

还已发现可从个体的脂笼蛋白-2基线水平，测定某些个体从使用降低未来心血管病风险的某些治疗剂获得较大或较小程度益处的可能性。本发明部分基于脂笼蛋白-2具有不依赖于其它未来心血管病指示物的预示值这一意想不到的发现。具体而言，脂笼蛋白-2不依赖于C-反应蛋白(CRP)和髓过氧化物酶(MPO)预测未来有害的心血管病。因此，脂笼蛋白-2可单独作为未来有害心血管病的指示物使用，或与包括但不限于胆固醇、CRP和MPO等现有技术的指示物联合使用。因此，本发明不包括简单地重复先前可用其它指示物进行的测量。相反，将脂笼蛋白-2水平添加到现有技术的指示物中。

如上所述，这些发现导致新的诊断测试。本发明一个方面提供用于表征个体发展未来心血管病的风险概况的方法。所述方法包括获得个体的脂笼蛋白-2水平。然后将该脂笼蛋白-2水平与预测定值比较，然后基于脂笼蛋白-2水平与预测定值的比较，表征发展未来心血管病的个体风险概况。预测定值可为单一值、多个值、单一范围或多个范围。因此，在一个实施方案中，预测定值是预测定标记水平范围的多个值，而比较步骤包括确定受试者标记水平所属于的预测定标记水平范围。