[发明专利]病毒定量方法

权利要求书

1.一种对从体液采集的人疱疹病毒数进行定量的方法，该方法包括以下步骤：

(1)在采集到的体液中添加预先确定了浓度的基准病毒；

(2)使(1)的液体与病毒结合物质接触，并且，

(i)该病毒结合物质上连接有能够与载体结合的分子，并且该病毒结合物质通过该分子结合于载体，从而结合有病毒结合物质的病毒间接地结合于载体，或者

(ii)该病毒结合物质直接结合于载体，从而使结合有病毒结合物质的病毒结合于载体；

(3)将该载体从(1)的液体中分离；

(4)对从分离出的载体处回收得到的病毒数进行定量：以及

(5)对回收得到的基准病毒数与(1)中添加的基准病毒数进行比较来评价回收率，由(4)中定量的人疱疹病毒数与该回收率确定从体液中采集的人疱疹病毒数。

2.一种对从体液采集的人疱疹病毒数进行定量的方法，该方法包括以下步骤：

(1)在采集到的体液中添加预先确定了浓度的基准病毒；

(2)使(1)的液体与凝集素接触，并且，

(i)该凝集素上连接有能够与载体结合的分子，并且该凝集素通过该分子结合于载体，从而与凝集素结合的病毒间接地结合于载体，或者

(ii)该凝集素直接结合于载体，从而使与凝集素结合的病毒结合于载体；

(3)将该载体从(1)的液体中分离；

(4)对从分离出的载体回收得到的病毒数进行定量：以及

(5)对回收得到的基准病毒数与(1)中添加的基准病毒数进行比较来评价回收率，由(4)中定量的人疱疹病毒数与该回收率确定从体液中采集的人疱疹病毒数。

3.一种对从唾液采集的人疱疹病毒数进行定量的方法，该方法包括以下步骤：

(1)在采集的唾液中添加预先确定了浓度的基准病毒；

(2)在(1)的液体中混合生物素化凝集素，使病毒与生物素化凝集素接触，再添加结合有生物素结合蛋白质的珠子，使与生物素化凝集素结合的病毒结合于珠子；

(3)将该珠子从(1)的液体中分离；

(4)对从分离出的珠子处回收的病毒数进行定量：以及

(5)对回收得到的基准病毒数与(1)中添加的基准病毒数进行比较来评价回收率，由(4)中定量的人疱疹病毒数与该回收率确定从唾液中采集的人疱疹病毒数。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，所述人疱疹病毒是人疱疹病毒6(HHV-6)或人疱疹病毒7(HHV-7)。

5.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，所述基准病毒是HHV-6或HHV-7来源的重组病毒。

6.根据权利要求2或3所述的方法，其中，所述凝集素是与包含N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)、α2-6键的唾液酸(Siaα2-6)、N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)中的至少一种的糖链结合的凝集素。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述凝集素选自SBA(大豆来源)、SSA(无梗接骨木来源)、DSA(白曼陀罗来源)和WGA(小麦胚芽来源)。

8.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，所述步骤(4)包括采用选自PCR、LAMP和ELISA中的方法对病毒数进行定量。

9.一种对从唾液采集的人疱疹病毒6(HHV-6)或人疱疹病毒7(HHV-7)的数量进行定量的方法，该方法包括以下步骤：

(1)在采集的唾液中添加预先确定了浓度的基准病毒，并使得基准病毒浓度是10～100,000基因组拷贝/ml，其中，该基准病毒是HHV-6或HHV-7来源的重组病毒；

(2)在(1)的液体中混合生物素化凝集素，使病毒与生物素化凝集素接触，再添加结合有生物素结合蛋白质的珠子，使与生物素化凝集素结合的病毒结合于珠子，其中，该凝集素选自SBA(大豆来源)、SSA(无梗接骨木来源)、DSA(白曼陀罗来源)和WGA(小麦胚芽来源)；

(3)将该珠子从(1)的液体中分离；

(4)采用选自PCR、LAMP和ELISA中的方法对从分离出的珠子处回收的病毒数进行定量；以及

(5)对回收得到的基准病毒数与(1)中添加的基准病毒数进行比较来评价回收率，由(4)中定量的人疱疹病毒数与该回收率确定从唾液中采集的人疱疹病毒数。