[发明专利]一种制备别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白的方法无效
| 申请号： | 200910255643.X | 申请日： | 2009-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN102094029A | 公开（公告）日： | 2011-06-15 |
| 发明（设计）人： | 刘少芳;陈英杰;路延笃;陈华新;李富超;秦松 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C12N15/52;C12N15/70;C07K14/405 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 许宗富;周秀梅 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 别藻蓝 蛋白 三聚体 荧光 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白的方法，其特征在于：首先将别藻蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白基因与藻胆素生物合成酶基因ho1和pcyA克隆到一个表达载体中；其次将别藻蓝蛋白β亚基脱辅基蛋白基因与色基裂合酶基因cpcS和cpcU克隆到另一个载体上，将两个表达载体同时转化大肠杆菌，筛选出同时表达上述基因的工程菌，即为别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白。
2.按权利要求1所述的制备别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白的方法，其特征在于：所述别藻蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白基因与藻胆素生物合成酶基因ho1和pcyA克隆载体为pCDFDuet；别藻蓝蛋白β亚基脱辅基蛋白基因与色基裂合酶基因cpcS和cpcU克隆载体为pRSFDuet。
3.按权利要求1所述的制备别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白的方法，其特征在于：所述别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白采用Ni柱亲和吸附，凝胶色谱法脱盐，蛋白浓缩及凝胶色谱分离，即得到纯化后的别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白。
4.按权利要求1所述的制备别藻蓝蛋白三聚体荧光蛋白的方法，其特征在于：所述别藻蓝蛋白脱辅基蛋白基因是指Synechocystis sp.PCC6803或与其同源的基因。
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