[发明专利]一种应用代谢组学对中成药质量评价的方法

说明书

技术领域

本发明属中药质量控制和评价方法，特别是采用生物指纹控制和评价中药质量，主要采用代谢组学相关技术和策略进行研究。

背景技术

中医药是中华民族的瑰宝，被称为中国古代的第五大发明。中药以其丰富的资源、独特的疗效、毒副作用少等特点，已引起世界各国的普遍关注。当今世界，随着“回归自然”思潮的兴起，寻找天然药物的呼声目渐高涨，面对医疗模式的转变，面对传统医药国际市场的竞争，面对加入WTO后知识产权的保护，中药的发展面临着良好的机遇和严峻的挑战。中药质量控制与保障是中药现代化、产业化及国际化的核心问题，中药的质量不可控、安全不可靠一直是其走向世界的“瓶颈”。与国际制药大国水平相比，我国绝大多数中药产品的生产工艺仍十分落后，对制药过程参数缺乏合理控制，不同厂家的同一产品或同一厂家不同批次的产品存在较大差异，这种状况已直接成为我国绝大部分中药迄今未能走出国门的一个重要原因。为保证中药产品的安全性、有效性和稳定均一性，当前急需发展先进的中药质量分析检测技术，完善中药材、提取物、中成药质量标准，建立符合中医药特点的现代质量控制体系，攻克中药质量分析与评价难题。

现行中药质量控制的基本模式是参照国外植物药的质量控制方法，借鉴化学药品质量控制的模式建立的，化学定性鉴别与指标成分检测是其主要内容。对于中医理论指导下的中药，尤其是复方制剂，检测任何一种活性成分均不能体现其整体疗效，这是中药与化学药品质量标准的根本区别。目前这种质控模式既难以有效地监控中药质量，也不能评价中药质量，更难以反映其安全性和有效性。如冬虫夏草测定腺苷含量、板蓝根检测精氨酸的存在，而腺苷和精氨酸既不是其主要有效成分，也不是其专属性成分，检测它们对其中药质量控制几乎没有实际意义。即使是检测有效成分，往往量效关系不明显，也难以实现对其中药质量进行有效的控制和评价。另外一个主流的质量控制方法：考虑到中药的多成分和整体作用，应用化学指纹图谱的方法，控制中药直接提取物中的尽量多的成分。对于中药而言，其疗效既不是单一活性成分的作用，也不是多种成分活性的简单相加，而是多个功能组分的整体表现，是多成分、多靶点协同作用的结果。中药化学指纹图谱虽然考虑了尽可能多的成分，对保证产品质量一致性和稳定性具有一定的促进作用，但同样难以反映其安全性和有效性，成分与药效之间的关联性在现阶段还没有得到有效的表达。另外，中药化学指纹图谱只是中药部分成分的“化学条形码”，不能对所有成分进行全面控制，有相当一部分药物成分难以用常规的色谱或光谱方法检识，化学指纹图谱的重复性、专属性和代表性等尚需深入研究。

因此，现有的中药质量控制模式虽然为保障中药及其产品的有效、安全和质量的稳定可控发挥了重要的作用，但还不足以说明中药的整体作用和作用的多成分、多靶点协同特点。有必要重新审视和明确中药质量控制和评价的目标与策略、模式与方法，有必要建立一套既能保证“稳定可控”，又能直接关切“安全有效”的新型中药质量控制管理方法体系。

中药生物指纹图谱学是从分子水平上研究中药作用的本质特征，研究化学成分和药理作用、药效活性的相关性。代谢组学作为一门新发展的技术，它是通过考察生物体系受刺激或扰动后其代谢产物的变化或其随时间的变化，来研究生物体系的一种技术。代谢组是基因-蛋白-代谢产物这样一个生命活动链的终点集合体，所反应的就是疾病、中药对生命体作用所产生效应的最终结果和表现，这与中医中药的哲学思想十分吻合。任何外源物质、病理生理变化或遗传变异的作用都会反映到各种生物学途径上，对内源代谢物质的稳态平衡产生干扰，从而使内源代谢物中的各种物质的浓度和比例发生变化。因此，应用代谢组学方法可从整体上对中药的毒性、疗效和作用机理进行评价，也可用于中药的质量控制。

发明内容

本发明提供了一种采用代谢指纹图谱控制和评价中成药质量的方法，该方法主要包括以下步骤：

1)根据中药的主要适应证，筛选建立相应的动物(细胞)模型；

2)根据中药的传统用药方法制备各样品，并采用相应的给药途径对动物(细胞)模型进行干预；

3)收集相应的生物样本，获取其代谢指纹图谱；

4)对正常组和模型组的代谢指纹进行模式识别，获取差异性内源代谢物(代谢标志物组)；

5)计算代谢标志物组在不同给药组中与正常组的相似度，或对差异性内源代谢物做PLS回归分析，考察药物治疗对内源性代谢的影响；

6)根据相似度计算结果或PLS分析结果，评价各样品的优劣。