[发明专利]用于治疗烈性肠道传染病的含霍乱毒素疫苗的制剂

说明书

技术领域

本发明涉及医药制剂领域，特别涉及用于肠道感染性疾病的疫苗，如霍乱、 痢疾、幽门螺杆菌等疫苗的口服制剂，制备方法及其应用。

背景技术

霍乱是一种威胁人类生存的烈性肠道传染病，是我国甲类传染病之一。 自有历史记载以来，全球共有七次霍乱大流行，每次大流行都导致数十万乃 至上百万人感染，成千上万人死亡。时至今日，霍乱仍在全球多个国家肆虐。

霍乱是由霍乱弧菌所致的烈性肠道传染病，临床上以剧烈无痛性泻吐、 米泔水样大便、严重脱水、肌肉痛性痉挛及周围循环衰竭等为特征。20世纪 60年代，国际上曾研制出多种肠道外霍乱疫苗，但由于不良反应重，保护力 仅在50％以内，保护期短，WHO生物标准化专家委员会决定于1999年起停止 使用。

口服疫苗能诱导肠道产生抗体，而肠道又是抗击霍乱的前线。不仅如此， 口服疫苗还能降低医疗成本，避免不必要的医疗伤害，因此，近年来口服霍 乱疫苗取得了较大发展。目前可获得的口服霍乱疫苗主要有：灭活全菌体霍 乱疫苗(WC疫苗)、灭活全菌体加B亚单位霍乱疫苗(WC/rBs疫苗)和减毒霍 乱活菌苗(CVD103-HgR减毒活疫苗)。

灭活全细胞菌苗(WC)最初是针对O1群霍乱的，在越南的现场试验中取得 了不错的保护效果(Trach DD，Clemens JD，Ke NT，et al.Field tial of a locally produced，killed，oral cholera vaccine in Viet Nam.Lancet， 1997，349(9047)：231-235.)，各年龄组8个月后的有效率为66％，但只在越 南和印度尼西亚等少数国家生产。随后，根据WHO腹泻病疫苗筹划指导委员 会的建议，研制成第2代灭活的全细胞二价菌苗，这种菌苗由O1群和O139 霍乱弧菌全细胞构成，其中包含了5×1010cfu福尔马林灭活的O139。在Hanoi 的研究是口服2剂，每剂1.5ml，间隔2周，但是免疫效果不理想(Trinka S Coster，Kevin P Killen，Matthew K Waldor，et al.Safety，immunogenicity， and efficacy of live attenuated vibrio cholerae O139 vaccine prototype. Lancet，1995，345(8955)：949-952)。

霍乱毒素B亚单位-灭活霍乱弧菌全菌体疫苗(BS-WC)在WC疫苗基础 上增加了霍乱毒素B亚单位(BS)。BS是优于霍乱类毒素但稍次于霍乱毒素的 良好免疫原。用BS和灭活霍乱弧菌全菌体疫苗(WC)构成的组合疫苗(BS-WC) 于1985～1989年在孟加拉霍乱流行区进行了现场试验。63498人接种疫苗后 最初6个月的免疫保护率为85％，3年后降至51％，证明BS-WC疫苗对霍乱有 良好的保护作用。在预防O1群霍乱方面，这种由重组的霍乱毒素B亚单位和 灭活的O1群霍乱全细胞组成的口服疫苗，已经取得了不错的效果，因此，世 界卫生组织对这种疫苗给予推荐(Wkly Epidem Rec2001；76(16)：117-124)。 在上世纪90年代，该疫苗已在瑞典批准注册生产。但这种疫苗需要在口服时 使用抗酸剂以中和胃酸，因此不良反应比较大。而且在霍乱爆发地，本身就 缺乏干净的水源，还需要大量的水溶解抗酸剂，无形中提高了用药的成本。

在BS-WC疫苗进入人体试验证明其具有良好的安全性、免疫原性和较高 保护率的基础上，口服霍乱疫苗的研制工作又向更深层次推进一步，即采用 重组BS(rBS)代替天然霍乱BS，构建了rBS-WC霍乱口服菌苗(陈清，俞守义， 王雅贤，等.冻干口服霍乱rBS-WC菌苗安全性及免疫原性的人群试验.中华预 防医学杂志，1996，30(6)：330-333.)。中国军事医学科学院生物工程研究所 马清钧等研究员，研制出了国家一类新药rBS-WC口服霍乱疫苗。这是我国科 学家自主研制的口服霍乱疫苗，成为世界卫生组织正式推荐的口服霍乱疫苗 之一。