[发明专利]一种燕麦多肽及其制备方法与应用有效
| 申请号: | 200910241723.X | 申请日: | 2009-12-02 | 
| 公开(公告)号: | CN101709321A | 公开(公告)日: | 2010-05-19 | 
| 发明(设计)人: | 何聪芬;王昌涛;董银卯;赵华;韩扬 | 申请(专利权)人: | 北京工商大学 | 
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K2/00;A23L1/305;A61K38/02;A61P9/12 | 
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 | 
| 地址: | 100037*** | 国省代码: | 北京;11 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 燕麦 多肽 及其 制备 方法 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种燕麦多肽及其制备方法与应用,特别涉及一种燕麦多肽及其制 备方法与其在制备抑制ACE活性和降血压的食品或药物中的应用。
背景技术
燕麦,禾本科燕麦族燕麦属,一年生或多年生草本植物。燕麦营养价值丰富而 全面,其蛋白质、脂肪、维生素E、膳食纤维以及钙、镁、铁、磷等矿物元素含量 均高于其它谷类作物,具有降血脂、降低胆固醇、降血压、降血糖和抗氧化性等多 种生物活性功能。
血管紧张素转化酶(Angiotensin-I-convertingen enzyme,ACE,EC 3.4.15.1)是一种 含锌二肽羧酶,广泛分布于哺乳动物组织中并对其血压调节起着关键性的作用。ACE 在人体肾素-血管紧张素系统(Renin angiotensin system,RAS)和激肽-激肽生成酶系统 (Kallikerni-kinin system,KKS)中,对血压调节起着重要的作用,具体调节机理如图1 所示。因此通过抑制体内ACE活性来达到治疗高血压的目的是一条非常重要的途 径。
近年来,一些具有特定生理活性的短肽,如ACE抑制肽、阿片肽、免疫调节肽 等引起了人们的极大关注,这些肽具有安全性高,无副作用、来源广泛等优点。植物 蛋白以其不可替代的优点成为人们研究活性肽的主要来源。燕麦降压肽即是从燕麦 蛋白中得到的一种活性多肽。燕麦麸皮是燕麦加工过程中的副产物,其中蛋白质含 量很高,目前国内外对燕麦麸皮的研究主要集中在膳食纤维方面,对燕麦麸皮蛋自 身的利用很少。
发明内容
本发明的目的是提供一种燕麦多肽及其制备方法与其应用。
本发明所提供的燕麦多肽的制备方法,包括如下步骤:
1)预处理:将燕麦麸皮与水混合,调节pH为8.5-9.5,在温度为50-60℃条件 下,进行超声波预处理;
2)酶处理:在经过步骤1)预处理后的液体中加入碱性蛋白酶,在50-60℃下 搅拌处理2-5小时;然后,加入风味蛋白酶,在50-60℃下搅拌处理1-2小时;
3)燕麦降压肽的纯化:将步骤2)酶解后的液体离心取上清液,在上清液中加 入β-葡聚糖酶,中温淀粉酶和糖化酶反应2-4小时,过滤得到澄清液体;将澄清液 体用大孔吸附树脂吸附纯化得到含燕麦多肽的溶液。
所述步骤1)中,所述超声预处理时间为30-50min;所述超声预处理的超声波 频率50kHz,功率176W。所述燕麦麸皮的大小为20-60目;所述燕麦麸皮∶水的重量 比为1∶8-1∶12。
所述步骤2)中,所述碱性蛋白酶的添加量为10000-70000U/g燕麦麸皮,优选 为50000U/g燕麦麸皮;所述风味蛋白酶的添加量为5000-15000U/g燕麦麸皮,优选 为10000U/g燕麦麸皮。所述碱性蛋白酶和所述风味蛋白酶可为四川新星化工有限公 司产品,所述中温淀粉酶可为湖北楚轩化工制造有限公司产品。
所述步骤3)中,所述大孔吸附树脂吸附纯化的步骤包括将所述澄清液体加入 到以打孔吸附树脂为填料的吸附柱中,然后用去离子水冲洗至洗脱液中没有糖分和 盐分,最后用乙醇溶液洗脱得到含燕麦多肽的溶液。所述大孔吸附树脂为DA201-C 吸附树脂;所述乙醇溶液的体积百分比浓度为50%-75%。所述澄清液体优选按照 DA201-C吸附树脂的2倍体积加入到柱中;所述乙醇溶液添加的体积优选为柱体积 的2倍
所述步骤3)中,β-葡聚糖酶的用量为15000-70000U/g燕麦麸皮,中温淀粉 酶的用量为125-500U/g燕麦麸皮,糖化酶的用量为500-2000U/g燕麦麸皮;所 述过滤的滤径为0.5-0.8μm。
上述方法中,还包括将含燕麦多肽溶液旋转蒸发浓缩至固含物为20%(可溶性 固形物含量)以上,冷冻干燥得到燕麦多肽干粉。
上述的方法制备的燕麦多肽即本发明所要保护的燕麦多肽。
本发明的方法将燕麦麸皮用单频超声波处理辅助酶法降解燕麦麸皮蛋白成为燕 麦多肽,通过板框过滤、树脂吸附等手段将其分离提纯,所得燕麦降压肽89%的分 子量在1500Da以下,具有抑制ACE的活性,可以广泛应用于降压保健食品或制备 降压药物等领域。
附图说明
图1为血管紧张素转化酶对血压的调节机理图
图2为本发明制备燕麦多肽的工艺流程图;
图3为75%乙醇洗脱纯化燕麦降压肽的曲线。
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