[发明专利]量子点荧光检测酶活性的方法

权利要求书

1.一种量子点荧光检测酶活性的方法，其特征是，该方法包括以下步骤：

(1)配制量子点溶液：将水溶性量子点分散在磷酸盐缓冲液中得到量子点溶液，量子点溶液中的水溶性量子点的摩尔浓度为1.3×10^-7～2.5×10^-3mol/L；

(2)配制反应底物溶液：将反应底物溶解在磷酸盐缓冲液中得到反应底物溶液，反应底物溶液中的反应底物的摩尔浓度为6×10^-4～3×10^-1mol/L；

(3)配制辅酶溶液：将辅酶溶解在磷酸盐缓冲液中得到辅酶溶液，辅酶溶液中的辅酶的摩尔浓度为0～5×10^-1mol/L；

(4)将步骤(1)、步骤(2)和步骤(3)配制的溶液混合，加入去离子水稀释得到量子点荧光检测酶活性的混合溶液，其中：量子点荧光检测酶活性的混合溶液中水溶性量子点的摩尔浓度为2.1×10^-8～6.5×10^-4mol/L，反应底物的摩尔浓度为8×10^-5～6×10^-2mol/L，辅酶的摩尔浓度为0～8×10^-2mol/L；

(5)将待检测的含有活性单位的酶溶液加入到步骤(4)得到的量子点荧光检测酶活性的混合溶液中，充分混合均匀并在常温下反应5～30分钟得到混合溶液体系；采用荧光分光光度计检测混合溶液体系，得到体系的荧光光谱，通过分析荧光光谱的荧光强度的变化测得待检测酶活性的数据；

所述的反应底物选自γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺、双甘肽、γ-谷氨酰-α萘胺、γ一谷氨酰对硝基苯胺、乳酸正丁酯、L-乳酸、丙酮酸、磷酸对硝基苯、对硝基酚磷酸二钠、磷酸苯二钠、L-丙氨酸、α-酮戊二酸、氯化乙酰胆碱所组成的组中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的量子点荧光检测酶活性的方法，其特征是：所述的磷酸盐缓冲液的浓度为0.01摩尔/升，pH值为6.8。

3.根据权利要求1所述的量子点荧光检测酶活性的方法，其特征是：所述的水溶性量子点的荧光发射波长位于400～700纳米，量子产率大于20％。

4.根据权利要求1或3所述的量子点荧光检测酶活性的方法，其特征是：所述的水溶性量子点是水溶性的CdTe量子点、CdTe/CdS量子点、CdTe/CdS/ZnS量子点、CdSe/ZnS量子点、ZnTe量子点或ZnSe量子点。

5.根据权利要求1所述的量子点荧光检测酶活性的方法，其特征是：所述的辅酶是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化态或其还原态。

6.根据权利要求1所述的量子点荧光检测酶活性的方法，其特征是：所述的待检测酶是γ-谷氨酰转移酶、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、胆碱酯酶或碱性磷酸酶。