[发明专利]栀子提取物的检测方法

权利要求书

1.一种栀子提取物检测方法，其特征在于指纹图谱检测方法为：

照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷 键合硅胶为填充剂；检测波长为238nm；流动相：乙腈-水，梯度洗脱，流 速：1ml/min，柱温：15-30℃；所述梯度洗脱是：0min乙腈比例为5％； 40min乙腈比例为10％；60min乙腈比例为15％；

供试品溶液的制备：精密称取栀子提取物10mg，置50mL容量瓶中， 用60-80％乙醇超声溶解后稀释，为供试品溶液；测定法：精密吸取供试品 溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于包括如下含量测定中方法中 的任意一种：

A：总环烯醚萜苷：取栀子提取物0.01g，精密称定，置50ml容量瓶中， 加入60-80％乙醇，超声处理10min，取出，放冷，取该溶液1ml，置10ml 量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品， 加甲醇制成每1ml含0.01mg的溶液，作为对照品溶液；分别取供试品溶液 和对照品溶液，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在220-250nm 波长处测定吸光度，计算，即得；

B：栀子苷：照高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，以 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以10-20∶75-95的乙腈-水为流动相； 检测波长为220-250nm；理论板数按栀子苷峰计算应不低于1500；对照品 溶液的制备：精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的 溶液，即得；供试品溶液的制备：取栀子提取物0.01g，精密称定，置50ml 容量瓶中，加入60-80％乙醇，超声处理10min，取出，放冷，加60-80 ％乙醇至刻度，摇匀，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶 液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于总环烯醚萜苷的含量测定方 法为：

取栀子提取物0.01g，精密称定，置50ml容量瓶中，加入70％乙醇， 超声处理10min，取出，放冷，取该溶液1ml，置10ml量瓶中，加70％乙醇 至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含 0.01mg的溶液，作为对照品溶液；分别取供试品溶液和对照品溶液，以相应 试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在238nm波长处测定吸光度，计算， 即得；栀子提取物按干燥品计算，含总环烯醚萜苷以栀子苷计，不得少于80％。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于栀子苷的含量测定方法为：

照高效液相色谱法测定，色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅烷 键合硅胶为填充剂；以14∶86的乙腈-水为流动相；检测波长为238nm；理 论板数按栀子苷峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备：精密称取栀子苷 对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；供试品溶液的制备： 取栀子提取物0.01g，精密称定，置50ml容量瓶中，加入70％乙醇，超声 处理10min，取出，放冷，加70％乙醇至刻度，摇匀，即得；测定法：分别 精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得； 栀子提取物按干燥品计算，含栀子苷不得少于60％。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于包括如下鉴别方法：

取栀子提取物置容量瓶中，加60-80％乙醇稀释，超声10-30min使溶 解，作为栀子提取物供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇溶解制成每1ml 含0.4mg的溶液，作为对照品溶液；取京尼平龙胆双糖苷对照品，加甲醇溶 解制成每1ml含0.25mg的溶液，作为对照品溶液；另称取栀子对照药材粉 末0.3-0.9g置于容量瓶中，加入60-80％乙醇25ml，超声提取30-50min， 滤过，即得对照药材溶液；参照薄层色谱法，吸取供试品溶液，对照品溶液 各5μl，分别点于同一硅胶G板上，以4-6∶4-7∶1∶1醋酸乙酯-丙酮- 甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8-20％硫酸乙醇溶液，105℃加 热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照色谱相同的位置上显相同颜色 斑点。