[发明专利]一种在细胞核和/或叶绿体中定位表达外源蛋白的方法无效
| 申请号： | 200910235401.4 | 申请日： | 2009-10-13 |
| 公开（公告）号： | CN102040655A | 公开（公告）日： | 2011-05-04 |
| 发明（设计）人： | 李毅;高锋;魏春红 | 申请（专利权）人： | 北京大学 |
| 主分类号： | C07K14/14 | 分类号： | C07K14/14;C12N15/46;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/00;C12N15/82;C12R1/94 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100871*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细胞核 叶绿体 定位 表达 蛋白 方法 | ||
1.一种多肽，其氨基酸序列如序列表的序列1所示。
2.编码权利要求1所述多肽的DNA片段。
3.如权利要求2所述的DNA片段，其特征在于：所述DNA片段的核苷酸序列如序列表的序列2所示。
4.含有权利要求2或3所述DNA片段的表达盒、重组表达载体、转基因细胞系或重组菌。
5.如权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体是将权利要求2或3所述DNA片段插入载体pRTL2的多克隆位点得到的。
6.一种在植物细胞的细胞核和/或叶绿体中定位表达外源蛋白的方法，是用权利要求1所述多肽作为信号肽引导外源蛋白在植物细胞的细胞核和/或叶绿体中定位表达。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述方法是通过将含有权利要求2或3所述DNA片段和所述外源蛋白的编码基因的融合DNA导入植物细胞实现的；所述融合DNA中，权利要求2或3所述DNA片段位于所述外源蛋白的编码基因的上游。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述融合DNA通过如下重组表达载体导入所述植物细胞：骨架质粒为pRTL2，在35S启动子后的多克隆位点依次插入权利要求2或3所述DNA片段和外源蛋白的编码基因，得到的重组质粒。
9.如权利要求6至8中任一所述的方法，其特征在于：所述植物细胞为烟草细胞。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于：所述植物细胞为烟草BY2细胞；所述外源蛋白为GFP蛋白。
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