[发明专利]一种制备注射用小粒径重组人血管内皮抑制素缓释微粒的方法

权利要求书

1. 一种体积平均粒径在1μm至100μm之间的注射用小粒径重组人血管内皮抑制素缓释微粒制剂的制备方法，其特征在于它包括下列步骤：

a.第一次乳化制备油包水的乳剂，其中内水相为含有重组人血管内皮抑制素的缓冲液，油相为含有乳酸-羟基乙酸聚合物的有机溶剂；致孔剂分散在内水相或油相中；所述缓冲液pH值范围在2至9；所述有机溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈、甲醇中的一种或两种混合；所述油相与内水相的体积比为99:1至51:49；

b.将两相混合分散乳化形成初乳，再加入含有亲水乳化剂二次乳化水相进行第二次分散乳化形成复乳，随后将此复乳加入含有亲水性乳化剂的外水相中，在常压或减压的条件下搅拌，使油包水乳剂中的有机溶剂挥发，聚合物发生相分离形成微粒，挥发过程保持温度范围在0至40℃，待微粒在液中干燥成型；所述亲水性乳化剂为聚乙烯醇、tween 20、 tween 60、tween 80中的一种或多种；所述第二次乳化分散乳化时间控制在2至60s之内；所述初乳与二次乳化水相的体积比为1:1至1:10；所述复乳与外水相的体积比为0.1:99.9至30:70；

c.将所得微粒收集、洗涤、干燥，得缓释微粒制剂成品。

2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述重组人血管内皮抑制素为Endostatin。

3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述重组人血管内皮抑制素为Endostar。

4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述缓释微粒中各组分重量百分比：重组人血管内皮抑制素占1%wt至30%wt、致孔剂占0%wt至30%wt、乳酸-羟基乙酸聚合物占40% wt至99%wt。

5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于重组人血管内皮抑制素的缓释微粒体积平均粒径为10μm至60μm之间。

6. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述缓冲液是醋酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液、甘氨酸-盐酸缓冲液中的一种；缓冲液的pH值范围在3至8；重组人血管内皮抑制素在缓冲液中的浓度为1 mg/ml至500 mg/ml。

7. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述第二次乳化分散使用高速机械剪切，机械分散的转速控制在6500rpm/min至13500rpm/min，乳化时间控制在2至30s之内。

8. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述有机溶剂为两种有机溶剂混合时，混合的组合选自二氯甲烷+乙酸乙酯、二氯甲烷+乙腈、二氯甲烷+甲醇、乙酸乙酯+乙腈、乙酸乙酯+甲醇中的一种，混合体积比例为0.1:9.9至9.9:0.1；乳酸-羟基乙酸聚合物在有机溶剂中的浓度为1 mg/ml至500 mg/ml。

9. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述亲水性乳化剂所占外水相的重量百分数范围在0.01%wt至5%wt。

10. 根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于其中聚乙烯醇聚合度范围在100至3000Da；醇解度范围在85至89%。

11. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述挥发过程控制的温度范围在4至30℃。