[发明专利]利用肠杆菌发酵生产2,3-丁二醇的方法无效
申请号: | 200910219506.0 | 申请日: | 2009-12-15 |
公开(公告)号: | CN101709281A | 公开(公告)日: | 2010-05-19 |
发明(设计)人: | 范代娣;马晓轩;朱晨辉;惠俊峰;陈火晴 | 申请(专利权)人: | 西北大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/18;C12R1/01 |
代理公司: | 西安西达专利代理有限责任公司 61202 | 代理人: | 谢钢 |
地址: | 710069 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 杆菌 发酵 生产 丁二醇 方法 | ||
1.肠杆菌Enterobacter sp.Y5在发酵生产2,3-丁二醇中的应用。
2.根据权利要求1所述用途,其特征在于发酵培养基的组成如下:
葡萄糖18~24g/L;胰蛋白胨4~6g/L;牛肉膏2~4g/L;酵母粉1~2g/L;NaCl 3~5g/L;KH2PO4 1~3g/L;MgSO4 0.1~0.3g/L;L-半胱氨酸0.3~1.0g/L;微量元素液8~15mL。
3.根据权利要求2所述用途,其特征在于:L-半胱氨酸为0.3~1.0g/L。
4.根据权利要求2所述用途,其特征在于微量元素液组成为:MnSO4.7H2O0.01g/L,ZnSO4.7H2O 0.05g/L,H3BO3 0.01g/L,CaCl2.2H2O 0.01g/L,NaMoO4 0.01g/L,AlK(SO4)20.01g/L。
5.根据权利要求1至4任意之一所述用途,其特征在于肠杆菌Enterobactersp.Y5发酵生产2,3-丁二醇步骤如下:
(1)Enterobacter sp.Y5种子的活化
从培养皿中用接种环取一环菌种到平板上进行平板划线,将其放置在36℃下静止培养24小时;
种子液体培养基:葡萄糖8~10g/L;蛋白胨3~5g/L;酵母粉2~4g/L;NaCl 2~4g/L;K2HPO4 0.5~1.5g/L;MgCl 0.2~0.4g/L;用浓磷酸将其pH调节到5.4~6.8;
固体培养基:液体培养基+1.5%琼脂;
(2)将上述步骤(1)中固体培养基上的菌种转接到上述步骤(1)中的液体培养基中进行种子的活化培养,液体种子液的活化采用100mL三角瓶,培养温度为30~38℃,培养时间为8-10小时;
(3)将上述步骤(2)种子液按4%~8%的接种量接入到发酵反应装置中,用硅胶塞塞好反应瓶,然后向反应装置中冲入惰性气体,将其放置于空气浴中培养,培养时间为10~14小时,发酵液即为含有2,3-丁二醇的液体;
(4)提取、分离得到2,3-丁二醇。
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