[发明专利]一种重组人单纯疱疹病毒I蛋白HSV I gG及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地涉及一种重组人单纯疱疹病毒I蛋白和以它作为抗原的检测试剂盒及其制备疫苗的应用。

背景技术

单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus，HSV)，呈球形，基因组为一线性DNA分子，由共价连接的长片段(L)和短片段(S)组成。30多种不同蛋白组成病毒结构蛋白(如衣壳蛋白、囊膜蛋白)，保护HSV的DNA，在HSV的致病作用和诱导机体免疫应答中起重要作用。

病人是传染源，主要通过直接密切接触和性接触传播。HSV经口腔、呼吸道、生殖道粘膜和破损皮肤等多种途径侵入机体。人感染非常普遍，感染率达80％～90％，常见的临床表现是粘膜或皮肤局部集聚的疱疹，偶而也可发生严重的全身性疾病，累及内脏。

HSV还可通过胎盘感染，影响胚胎细胞有丝分裂，易发生流产、造成胎儿畸形、智力低下等先天性疾病。约40％～60％的新生儿在通过HSV感染的产道时可被感染，出现高热、呼吸困难和中枢神经系统病变，其中60％～70％受染新生儿可因此而死亡，幸存者中后遗症可达95％。此外一些调查研究表明HSV可能与唇癌、外阴癌及子宫颈癌有关(Kriebs JM.Understanding herpes simplex virus：transmission，diagnosis，and considerations in pregnancymanagement.J Midwifery Womens Health.2008May-Jun；53(3)：202-8)。建立HSV感染的快速、准确检测方法是预防HSV感染的关键所在。

人单纯疱疹病毒分为I型和II型，目前疱疹病毒感染诊断方法有病毒分离(Tanchev S，Shentov B.Herpes simplex virus infection in pregnancy and transmission to neonatal.AkushGinekol(Sofiia).2005；44(6)：31-5.)、PCR法(Kimberlin DW.Diagnosis of herpes simplex virus inthe era of polymerase chain reaction.Pediatr Infect Dis J.2006Sep；25(9)：841-2.)和血清学检查(Eing BR，Lippelt L，Lorentzen EU，et al.Evaluation of confirmatory strategies for detectionof type-specific antibodies against herpes simplex virus type 2.Journal of ClinicalMicrobiology.2002，40(2)：407-413；Strick L，Wald A.Type-specific testing for herpessimplex virus[J].Expert Rev Mol Diagn，2004，4(4)：443-453；Martins TB，Welch RJ，HillHR，Litwin CM.Comparison of a Multiplexed HSV Type-specific IgM Serology Assay toELISA，Immunoblot and Western Blot.Clin Vaccine Immunol.2008Nov 19.)。血清学检查简便快速的特性使其在临床上得到广泛应用。

在全球范围内，目前缺乏有效治疗病毒感染药物的情况下，通过接种疫苗预防病毒感染成为一种重要的医学干预手段。同时，HSV疫苗的研制也是进行HSV研究的重要领域之一。具有高特异性、强免疫原性和尽量完整的抗原决定簇的HSV蛋白抗原，在HSV的诊断和疫苗研制领域具有重要的实际应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种重组人单纯疱疹病毒I蛋白HSV I gG的基因片段，它的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明的另一个目的是提供一种重组人单纯疱疹病毒I蛋白HSV I gG，它的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

本发明一种重组人单纯疱疹病毒I蛋白HSV I gG，是由下述方法制备的：

a、人工合成引物：

P1：5’ACCATATGCAACCCCAACTCCAGACCACCG3’

P2：5’ACCTCGAGCCCGCGTTCGGACGGCAGG3’

b、以人单纯疱疹病毒培养物为模板，PCR扩增，获得基因片段HSV I gG；