[发明专利]一种锯缘青蟹双顺反子病毒检测方法及其试剂盒无效
| 申请号： | 200910213698.4 | 申请日： | 2009-12-08 |
| 公开（公告）号： | CN101710125A | 公开（公告）日： | 2010-05-19 |
| 发明（设计）人： | 张锐;翁少萍;何建国;董传甫;邓燮雄 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | G01N33/577 | 分类号： | G01N33/577;C07K16/10 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510275 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 锯缘青蟹双 顺反子 病毒 检测 方法 及其 试剂盒 | ||
1.一种锯缘青蟹双顺反子病毒检测方法，其特征在于该方法是利用与MCDV特异性结合的单克隆抗体，采用双抗体夹心ELISA技术对锯缘青蟹双顺反子病毒进行检测；
上述与MCDV特异性结合的单克隆抗体为：
与MCDV结构蛋白1特异性结合的单克隆抗体，所述MCDV结构蛋白1的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；
与MCDV结构蛋白2特异性结合的单克隆抗体，所述MCDV结构蛋白2的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示；
与MCDV结构蛋白3特异性结合的单克隆抗体，所述MCDV结构蛋白3的氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述双抗体夹心ELISA为多抗-单抗双抗体夹心ELISA方法和双单抗夹心ELISA方法。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于所述双抗体夹心ELISA为双单抗夹心ELISA方法。
4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于所述双单抗为与MCDV结构蛋白1特异性结合的单克隆抗体和与MCDV结构蛋白3特异性结合的单克隆抗体。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述双抗体夹心ELISA中，酶标记抗体时酶与抗体的质量比为1∶1。
6.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于所述双抗体夹心ELISA方法的检测条件为：采用1％BSA的封闭，4％BSA-PBS作为酶标抗体稀释液，酶标抗体作用时间为30min，底物在室温下避光作用15min。
7.根据权利要求1所述检测方法，其特征在于所述双抗体夹心ELISA中，酶标单克隆抗体的工作浓度为1∶3200。
8.根据权利要求2所述检测方法，其特征在于所述多抗-单抗双抗体夹心ELISA方法和双单抗夹心ELISA方法中，单抗的工作浓度为1∶1600，兔多抗的工作浓度为1∶800。
9.一种权利要求1所述检测方法的专属检测试剂盒，其特征在于该试剂盒包含与MCDV特异性结合的单克隆抗体；
上述与MCDV特异性结合的单克隆抗体为：
与MCDV结构蛋白1特异性结合的单克隆抗体，所述MCDV结构蛋白1的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；
与MCDV结构蛋白2特异性结合的单克隆抗体，所述MCDV结构蛋白2的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示；
与MCDV结构蛋白3特异性结合的单克隆抗体，所述MCDV结构蛋白3的氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示。
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