[发明专利]SYBR Green法检测解脲支原体感染的荧光PCR试剂盒无效
| 申请号: | 200910200392.5 | 申请日: | 2009-12-11 |
| 公开(公告)号: | CN102094072A | 公开(公告)日: | 2011-06-15 |
| 发明(设计)人: | 穆海东;汪宁梅;穆宇豪;黎飒 | 申请(专利权)人: | 上海裕隆临床检验中心有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 200233 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | sybr green 检测 支原体 感染 荧光 pcr 试剂盒 | ||
1.一种SYBR Green法检测解脲支原体感染的荧光PCR试剂盒,包括阴性参考品、阳性对照品、Taq聚合酶、荧光PCR反应液,以及DNA提取液;所述的荧光PCR反应液包括解脲支原体PCR分型引物。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的阳性对照品为含有插入解脲支原体特异序列的PMD18-T载体质粒,所述插入的特异序列如下:
ACTCCTACGG GAGGCAGCAG TAGGGAATTT TTCACAATGG GCGCAAGCCT TATGAAGCAA TGCCGCGTGA
ACGATGAAGG TCTTATAGAT TGTAAAGTTC TTTATATGGG AAGAAACGCT AAGATAGGAA ATGATTTTAG
TTTGACTGTA CCATTTGAAT AAGTATCGGC TAACTATGTG CCAGCAGCCN CGGTAATACA TAGGATGCAA
GCGTTATCCG GATTTACTGG GCGTAAAACG AGCGC 245bp。
3.如权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于,所述的阳性对照品重组质粒的扩增结果解脲支原体循环数小于30.0。
4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的阴性参考品为解脲支原体阴性血清。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述的PCR分型引物序列如下:
扩增检测解脲支原体的正向引物ACTCCTACGGGAGGCAGCAGTA 22;
扩增检测解脲支原体的反向引物GCGCTCGTTTTACGCCCAGTA 21。
6.如权利要求1或5所述的试剂盒,其特征在于,所述的荧光PCR反应液加入了SBRY Green的荧光染料。
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