[发明专利]G-CSF融合蛋白突变体及其制备与应用

权利要求书

1.一种G-CSF融合蛋白突变体，为具有刺激中性粒细胞增殖活性的融合蛋白，其结构为 G-CSF/载体蛋白或载体蛋白/G-CSF，其中，G-CSF部分与SEQ ID NO：1相比，突变为 K34H,L35I,K40H及L41I突变中的任一种，或者为K34H与L35I突变组合、K34H与 K40H突变组合、K34H与及L41I突变组合、L35I与K40H突变组合、L35I与L41I突变 组合、K40H与L41I突变组合中的任一种，或者为K34H,L35I,K40H,L41I,T1A,L3T,G4Y 及P5R突变组合，所述载体蛋白选自人血清白蛋白。

2.如权利要求1所述G-CSF融合蛋白突变体，其特征在于，所述G-CSF部分氨基酸序列为 SEQ ID NO:2。

3.如权利要求1所述G-CSF融合蛋白突变体，其特征在于，所述G-CSF融合蛋白突变体氨 基酸序列为SEQ ID NO:4。

4.一种多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸编码如权利要求1所述G-CSF融合蛋白突 变体。

5.一种含有权利要求4所述的多核苷酸的序列的表达载体。

6.一种重组的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求5所述的表达载体、或 者染色体中整合有权利要求4所述的多核苷酸。

7.一种制备权利要求1所述G-CSF融合蛋白突变体的方法，该方法包括：合成含有能表达 权利要求1所述G-CSF融合蛋白突变体的核苷酸序列，将此核苷酸序列构建至表达载体 中，然后将含有融合蛋白基因序列的表达载体转化至宿主细胞中诱导表达，通过亲和层 析、离子交换层析和疏水层析制备这种融合蛋白。

8.一种药物组合物，含有权利要求1所述G-CSF融合蛋白突变体及至少一种药学可接受的 载体或赋形剂。

9.权利要求1-3中任一权利要求所述G-CSF融合蛋白突变体在制备治疗中性粒细胞减少症 或白细胞减少症的药物中的应用。