[发明专利]一种适冷木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶、其制备方法及应用有效
申请号: | 200910198068.4 | 申请日: | 2009-10-30 |
公开(公告)号: | CN102051350A | 公开(公告)日: | 2011-05-11 |
发明(设计)人: | 吕红;周峻岗;袁汉英 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12N1/15;C12N5/10;A23K1/165;C12P7/10;C12P19/14;C12R1/19;C12R1/865;C12R1/84;C12 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 吴桂琴;包兆宜 |
地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适冷木 糖苷酶 阿拉伯 制备 方法 应用 | ||
1.一种木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶,其特征是,其氨基酸序列如SEQID NO.2所示。
2.如权利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶,其特征是,它的核苷酸编码序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种含有权利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶的核苷酸编码序列的重组载体。
4.如权利要求3所述的重组载体,其特征是,该重组载体是大肠杆菌表达载体、酿酒酵母表达载体、毕赤酵母表达载体、枯草芽孢杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、丝状真菌表达载体、昆虫表达载体或者哺乳动物细胞表达载体中的任意一种。
5.一种含有权利要求3所述的重组载体的重组菌株。
6.如权利要求5所述的重组菌体,其特征是,该菌株的宿主细胞是大肠杆菌、酿酒酵母、毕赤酵母、枯草芽孢杆菌、乳酸菌、丝状真菌、昆虫或者哺乳动物细胞中的任意一种。
7.如权利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶的制备方法,包括培养重组菌株和分离目标蛋白,其特征是该制备方法依次包括以下步骤:
(1)利用引物进行聚合酶反应扩增,获得权利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶的核苷酸编码序列,构建木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶重组表达载体;
(2)将重组表达载体导入表达宿主细胞,在重组菌体表达木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶;
(3)分离回收木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶。
8.如权利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶的制备方法,其特征是按照SEQ ID NO.2所示序列人工合成所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶。
9.权利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶在饲料组合物的制备、半纤维素或阿拉伯木聚糖的糖化或乙醇生产方面的用途。
10.一种含有木聚糖酶和权利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶双功能酶的组合物。
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