[发明专利]一种利用啤酒麦糟制备多杀菌素和饲料添加剂的方法无效
申请号: | 200910192898.6 | 申请日: | 2009-09-30 |
公开(公告)号: | CN101691594A | 公开(公告)日: | 2010-04-07 |
发明(设计)人: | 朱明军;胡飞;浦跃武 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12P19/62 | 分类号: | C12P19/62;A23K1/16;A01N43/22;A01P7/04;C12R1/01 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 裘晖 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 啤酒 制备 杀菌 饲料添加剂 方法 | ||
技术领域
本发明属于微生物发酵生产领域,特别涉及一种利用啤酒工业的废弃物 ——啤酒麦糟为原料,利用纤维素酶和刺糖多孢菌糖化发酵制备多杀菌素和 饲料添加剂的方法。
背景技术
啤酒麦糟是啤酒工业的主要副产物(占副产物的80%以上),其蛋白质含 量为23%~30%(以干重计),是一种很好的蛋白质资源。迄今为止主要作 为饲料廉价出售。但是由于啤酒麦糟中粗纤维含量较高,蛋白质中氨基酸平 衡性差,其饲用价值很低。将粗纤维糖化后发酵制备高蛋白饲料是啤酒麦糟 综合利用的方向。啤酒麦糟中的纤维除纤维素外,还含有大量的半纤维素, 如何利用啤酒麦糟中的半纤维素或者其水解物(主要是木糖)也是值得关注 的问题。
刺糖多孢菌能够在好氧条件下发酵合成生物农药——多杀菌素。我们的 研究发现,刺糖多孢菌也能利用木糖合成多杀菌素。以啤酒麦糟为原材料, 以刺糖多孢菌为菌种,进行酶解发酵制备多杀菌素和饲料添加剂,不仅可以 很好的利用啤酒麦糟中的纤维素,而且可以利用其中的半纤维素。
以工业废弃物——啤酒麦糟为原料进行糖化发酵制备多杀菌素和饲料添 加剂,不仅可以发酵合成多杀菌素,而且可以提高饲料添加剂的质量,对提 高啤酒麦糟的附加值具有重要意义。
发明内容
为了解决上述现有技术的不足之处,本发明的首要目的在于提供一种利 用啤酒麦糟制备多杀菌素和饲料添加剂的方法。
本发明的另一目的在于提供上述方法制备的多杀菌素和饲料添加剂。
本发明的再一目的在于提供上述多杀菌素和饲料添加剂的用途。
本发明的目的通过下述技术方案实现:一种利用啤酒麦糟制备多杀菌素 和饲料添加剂的方法,包括以下操作步骤:
(1)啤酒麦糟的预处理:将啤酒麦糟与水混合后湿磨,压榨,得到固 体渣I和浆液;
(2)啤酒麦糟的酶解:将步骤(1)所得固体渣I以干重计,与水按照 固液质量体积比1∶5~1∶10混合,调节pH值至4.5~5.0;按照每克固形 物(干)添加4~20FPU的量加入纤维素酶,进行酶解反应;分离得到酶解 液和固体渣II;
(3)发酵培养基调配和灭菌:向步骤(2)所得酶解液中加入占酶解 液体积0.2~1.0%的玉米浆,调节pH值至7.2~7.4,然后加入占酶解液体积 0.2~0.6%的碳酸钙,高温灭菌,冷却至室温,得到发酵培养基;
(4)刺糖多孢菌种子液的制备:将低温保存的刺糖多孢菌 (Saccharopolyspora spinosa)或者其变异株经试管斜面、摇瓶逐级放大,制 得刺糖多孢菌种子液;
(5)发酵培养:将步骤(4)所得刺糖多孢菌种子液按照体积百分比5%~ 10%的接种量接种到步骤(3)所得发酵培养基中,好氧发酵,得到发酵液;
(6)多杀菌素的提取:向步骤(5)所得发酵液中加入等体积的丙酮, 搅拌,静置过夜;过滤去除菌丝体,调节pH值至9.5~10.5,滤液过树脂吸 附,用丙酮解吸,得到多杀菌素提取液;
(7)菌体及蛋白的干燥:将步骤(6)所述菌丝体洗涤后与步骤(1) 所得浆液以及步骤(2)所得固体渣II混合,经干燥后得到饲料添加剂。
步骤(1)所述啤酒麦糟与水混合是将啤酒麦糟以湿重计,与水按照固 液质量体积比1∶1~1∶3混合。
步骤(2)所述酶解反应的温度控制在40~50℃,反应时间为12~96 小时。
步骤(3)所述高温灭菌是在115~125℃下灭菌20~60分钟;步骤(4) 所述低温保存是在-196℃、-80℃、-20℃或4℃条件下保存。
步骤(4)所述刺糖多孢菌或者其突变株为DSM 44228(德国DSM菌 种保藏中心)或者其突变株。
步骤(5)所述好氧发酵的温度控制在28~32℃,发酵时间为7~8天。
步骤(6)所述搅拌的时间为20~60分钟;所述树脂为大孔吸附树脂。
一种根据上述方法制备的多杀菌素。
一种根据上述方法制备的饲料添加剂。
上述多杀菌素可应用于制备杀虫剂,对鳞翅目(包括菜青虫、小菜蛾、 棉铃虫、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、烟芽夜蛾、谷实夜蛾、苹果卷叶蛾、桃潜叶 蛾、菜螟或粘虫等)和缨翅目害虫(包括棕榈蓟马、温室蓟马、花蓟马或稻 蓟马等)有较广的杀虫谱和较高的杀虫活性。
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