[发明专利]一种高效发酵床复合菌剂及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种高效发酵床复合菌剂及其制备方法和用途，其特征在于：不仅包括植物乳杆菌CICC6073、热带假丝酵母CGMCC2.587、康宁木霉CGMCC3.4290、枯草芽孢杆菌CGMCC1.769、CGMCC1.210高活性益生菌，活菌数分别为1-2×10⁹cfu/ml、5-8×10⁸cfu/ml、3-5×10⁸cfu/ml、3-5×10⁹cfu/ml、2-5×10⁹cfu/ml，还包括其代谢产物淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、有机酸及抗菌素。

2.如权利要求1所述的一种高效发酵床复合菌剂，其特征在于，是由下列步骤制成的：

1)、斜面菌种活化：

取安瓿管菌种，分别无菌操作接种于相应的试管斜面培养基中，植物乳杆菌30-37℃恒温培养48-72h；康宁木霉、热带假丝酵母菌25-30℃恒温培养48-72h；枯草芽孢杆菌35-37℃恒温培养24-36h；制成试管斜面菌种，4℃冰箱保藏备用。

2)、种子液的制备：

A、植物乳杆菌种子液的制备：取冰箱保藏斜面菌种，无菌操作接种于装有150-200ml的MRS培养基的500ml三角瓶中，转速100-150rpm，30-37℃恒温培养20-30h。

B、热带假丝酵母、康宁木霉菌种子液的制备：取冰箱保藏斜面菌种，分别无菌操作接种于装有100-200ml的麦芽汁培养基的500ml三角瓶中，转速100-150rpm，25-30℃恒温培养24-36h。

C、枯草芽孢杆菌种子液的制备：取冰箱保藏斜面菌种，分别无菌操作接种于装有30-50ml的LB培养基的500ml三角瓶中，转速200-240rpm，35-37℃恒温培养8-16h。

3)、高效复合菌剂的制备

将植物乳杆菌种子液按照3-10％的接种量，接种于装有30-35L发酵培养基的50L发酵罐中，控制初始pH值为6.5-7.0，搅拌转速100-150rpm，通气量0.15-0.3V/V·min，30-37℃培养12-20h；再将热带假丝酵母菌、康宁木霉种子液按照3-10％的接种量分别同时接种，搅拌转速100-150rpm，通气量0.15-0.3V/V·min，25-30℃培养12-24h；再按照3-10％的接种量分别同时接种枯草芽孢杆菌，搅拌转速160-200rpm，通气量0.3-0.8V/V·min，35-37℃培养12-20h；活菌数分别达到1-2×10⁹cfu/ml、5-8×10⁸cfu/ml、3-5×10⁸cfu/ml、3-5×10⁹cfu/ml 2-5×10⁹cfu/ml，终止发酵，分装密封，即得高效复合菌剂。

权利要求2步骤3)中所述的发酵培养基配方为(g/L)：葡萄糖40，酵母膏5，大豆蛋白胨18，氯化钠5，121℃灭菌20min。

3.如权利要求1、2所述的高效发酵床复合菌剂，其特征在于，是按照下列步骤制备发酵床垫料的：

1)铺10cm木屑，洒水达到30-40％湿度；

2)复合菌剂的使用量为1L/m³，将复合菌剂适当稀释，均匀泼洒在木屑表面；

3)铺10cm稻壳，洒水至30-40％湿度；

重复以上步骤2-4次，最后一层表面铺木屑10cm，将发酵池填满至50cm-100cm，喷水到湿度30-40％，发酵床垫料的铺设即完成。垫料原料还可以是锯末、稻壳、秸秆、花生壳常见的农作物下脚料的组合。