[发明专利]H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的人源化抗体及其用途

权利要求书

1.能与鼠单克隆抗体13D4竞争结合H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的人源化抗体，所述鼠单克隆抗体13D4为杂交瘤细胞株13D4所产生的单克隆抗体，杂交瘤细胞株13D4保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号是CCTCC-C200721。

2.权利要求1所述的人源化抗体，其是衍生自鼠单抗13D4的人源化抗体。

3.权利要求1或2所述的人源化抗体，包含：含有氨基酸序列为SEQ ID NOs：4-6的CDR中的一个或多个(如1、2或3个)CDR的重链可变区，或其含有一个或多个(例如1-10个，1、2、3、4或5个)氨基酸替代的变异体。

4.权利要求1或2所述的人源化抗体，包含：含有氨基酸序列为SEQ ID NOs：7-9的CDR中的一个或多个(如1、2或3个)CDR的轻链可变区，或其含有一个或多个(例如1-10个，1、2、3、4或5个)氨基酸替代的变异体。

5.如权利要求3所述的人源化抗体，其中，所述的重链可变区包括选自如下一组的氨基酸序列：

SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12，SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：20，SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：24、SEQ IDNO：26，SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：32或其变异体或片段。

6.如权利要求4所述的人源化抗体，其中，所述的轻链可变区包括选自如下一组的氨基酸序列：

SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：21，SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：25、SEQ IDNO：27，SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：33或其变异体或片段。

7.权利要求1-6任一项所述的人源化抗体，其包括非-CDR区，该非-CDR区来自不是鼠类的物种。

8.权利要求7所述的人源化抗体，其中，所述的非-CDR区来自人类的抗体。

9.权利要求8所述的人源化抗体，其中，所述的人类非-CDR区具有一个或多个(例如1-20个，优选1-10个，1-5个)保守氨基酸替代。

10.权利要求1-9任一项所述的人源化抗体，其中，所述的抗体为Fab、Fab′、F(ab)₂、scFv或Fv。

11.权利要求1-10任一项所述的人源化抗体，其结合H5亚型禽流感病毒血凝素的KD值小于1x10^-5M。

12.如权利要求11所述的抗体，其结合H5亚型禽流感病毒血凝素的KD值小于1x10^-6M。

13.一种能特异性结合H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的单克隆抗体，其包含：含有氨基酸序列为SEQ ID NOs：4-6的CDR中的一个至三个CDR的重链可变区，和/或含有氨基酸序列为SEQ ID NOs：7-9的CDR中的一个至三个CDR的轻链可变区。

14.权利要求13所述的单克隆抗体，其中，所述的单克隆抗体为杂交瘤细胞株13D4所产生的单克隆抗体，杂交瘤细胞株13D4的保藏号是CCTCC-C200721.

15.权利要求13或14的单克隆抗体的人源化抗体，其能特异性结合H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白，优选地其基本上保持所述单克隆抗体的特异性、亲和性和反应性，例如保持至少70％、80％、优选90％的特异性、亲和性和反应性。

16.编码权利要求1-15任一项的抗体的重链、轻链、重链可变区、或轻链可变区的核酸分子。

17.一种核酸分子，其包含能够编码抗体重链可变区的核酸序列，而所述的抗体重链可变区则包含选自如下一组的氨基酸序列：SEQ IDNOs：4-6。

18.一种核酸分子，其包含能够编码抗体轻链可变区的核酸序列，而所述的抗体轻链可变区则包含选自如下一组的氨基酸序列：SEQ IDNOs：7-9。