[发明专利]乳清蛋白的分离和测定方法

权利要求书

1.一种通过液相色谱质谱联用测定牛乳清蛋白的方法，它包括以下分离步骤 和测定步骤：

在分离步骤中，对乳清蛋白进行预处理后，用以1.7μm亚乙基桥杂化颗粒为 填料的超高效液相色谱柱对试样中的牛乳α－乳白蛋白和牛乳βa－乳球蛋白、牛乳 βb－乳球蛋白进行分离；

在测定步骤中，添加人α－乳白蛋白作为内标，用质谱仪进行区间扫描，对未 变性的上述牛乳白蛋白和牛乳球蛋白进行定量；

所述超高效液相色谱柱为ACQUITY UPLC BEH300C18柱；

所述预处理包括用含Triton X-100的NaCl溶液将样品溶解后，用含TFA溶液 调节pH至4.6，定容、均质后离心分离，取上清液用滤膜过滤；

所述超高效液相色谱使用含0.06－0.10％三氟乙酸的水/乙腈溶液作为溶剂和 流动相，进行梯度洗脱；

选用下述质量数范围作为牛乳清蛋白定量的扫描区间：牛α－乳清蛋白为2357 －2368质荷比，牛βb－乳球蛋白为1656－1666质荷比，牛βa－乳球蛋白为1665 －1675质荷比；

采用基质加标法；

对加标基质进行微波处理；

用于人α－乳白蛋白区间扫描的质量数范围为2340－2350质荷比。