[发明专利]维生素-定向的显象剂

说明书

本申请是申请号为03814683.5，发明名称为“维生素-定向的显象剂”的发明专利申请的分案申请。 

发明领域

本发明涉及用于将显象剂引导到动物细胞上的化合物和方法。更具体地讲，通过利用维生素或维生素受体结合衍生物或其类似物作为显象剂的定向配体，将放射性核素型显象剂引导到具有维生素受体的细胞上。 

发明背景和概述 

跨膜转运是一种重要的细胞功能。由于对于包括药物治疗和基因转移在内的很多医学和生物科学领域来说，实践者业已认识到了跨膜转运的重要性，为了理解和应用所述方法，业已进行了大量的研究努力。因此，举例来说，业已通过利用蛋白载体，抗体载体，脂质体输送系统，电穿孔，直接注射，细胞融合，病毒载体，渗透压冲击，和磷酸钙介导的转化尝试了核酸的跨膜输送。不过，很多这样的技术同时局限于进行跨膜转运的细胞的类型，以及使外源分子进行成功的跨膜转运所需要的条件。另外，很多这样的技术局限于外源分子的类型和大小，所述外源分子能够通过细胞膜转运而又不丧失生物活性。 

具有广泛用途的外源分子的跨膜转运的一种机制是受体介导的细胞内吞作用。优选的是，受体介导的细胞内吞作用同时在体内和体外进行。受体介导的细胞内吞作用涉及与膜受体结合的配体通过膜的内陷转移到由所述膜所包围的部位的内部。所述过程是通过受体专一性配体与所述受体的结合启动的或激活的。业已表征了多种受体介导的细胞内吞系统，包括能导致以下分子内在化的系统：半乳糖，甘露糖，甘露糖6磷酸，转铁蛋白，去唾液酸糖蛋白，叶酸，运钴胺素蛋白(维生素B₁₂)，α-2巨球蛋白，胰岛素，和其他肽生长因子，如表皮生长因子(EGF)。 

业已将受体介导的细胞内吞作用用于将诸如蛋白和核酸的外源分子输送到细胞中。一般，特定的配体是通过共价键，离子，或氢键结合与感兴趣的外源分子化学缀合的，形成在缀合物中仍然能够被靶受体识 别的部分(配体部分)的缀合分子。通过这种技术，业已将光毒性蛋白补骨脂素缀合在胰岛素上，并且通过胰岛素受体细胞内吞途径内在化(Gasparro，Biochem.Biophys.Res.Comm.141(2)，pp.502-509，Dec.15，1986)；业已将半乳糖末端去唾液酸糖蛋白的肝细胞的专一性受体用于与质粒非共价络合的缺乏唾液酸基的血清类黏蛋白-聚-L-赖氨酸的肝细胞专一性跨膜输送(Wu，G.Y.，J.Biol.Chem.，262(10)，pp.4429-4432，1987)；业已将EGF的细胞受体用于将与EGF共价连接的多核苷酸输送到细胞内部(Myers，欧洲专利申请86810614.7，公开日为1988年6月6日)；业已将位于肠道中的有机金属维生素B12-内在因子络合物的细胞受体用于介导与维生素B12络合的药物，激素，生物活性肽和免疫原的输送，在口服之后输送到循环系统中(Russell-Jones等，欧洲专利申请86307849.9，公开日为1987年4月29日)；业已将甘露糖-6-磷酸受体用于输送低密度脂蛋白到细胞中(Murray，G.J.和Neville，D.M.，Jr.，J.Biol.Chem，Vol.255(24)，pp.1194-11948，1980)；业已将霍乱毒素结合亚基受体用于将胰岛素输送到缺乏胰岛素受体的细胞中(Roth和Maddox，J.Cell.Phy s.Vol.115，p.151，1983)；并且业已将人绒膜促性腺激素受体用于将与HCG结合的蓖麻毒蛋白a-链输送到具有合适HCG受体的细胞中(Oeltmann和Heath，J.Biol.Chem，vol.254，p.1028(1979))。 

在本发明的一种实施方案中，涉及到放射性核素-型显象剂通过具有维生素受体，或维生素受体结合衍生物或其类似物的跨膜转运。让具有维生素受体，或维生素衍生物或类似物的受体的细胞膜与维生素-显象剂缀合物接触足够的时间，以便启动并且进行所述缀合物的跨膜转运，并且监测所述维生素-显象剂缀合物在所述动物体内的生物分布。在另一种实施方案中，所述维生素/维生素衍生物或类似物定向部分只是与细胞表面维生素受体结合，以便在所述细胞表面上浓缩螯合的放射性核素。