[发明专利]中药口服制剂的检测方法及应用

权利要求书

1.一种中药口服制剂的检测方法，该口服制剂选自颗粒剂、胶囊剂和 片剂，并且该制剂由独一味和三七制成，其特征在于，所述检测方法包括 以下检测项目：木犀草素含量和皂苷类含量的测定、独一味的鉴别和树脂 残留物的检查；

其中，所述木犀草素含量的测定是采用高效液相色谱法，其中所述高 效液相色谱的条件为：填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇 -0.4％磷酸溶液(50∶50)，检测波长为350nm；并且，所述木犀草素含量 的测定方法包括以下步骤：

1)供试溶液的制备：取所述胶囊内容物，研细，取约0.5g，精密称 定，置具塞锥形瓶中，精密加入2.5mol/L盐酸甲醇溶液25ml，称定重量， 回流提取60分钟，取出，放冷，以2.5mol/L盐酸甲醇溶液补足减失的重 量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻 度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试溶液；

2)对照溶液的制备：精密称取木犀草素对照品适量，加甲醇制成每 1ml含15ug的溶液，摇匀，作为对照溶液；

3)分别取步骤1)和2)所制备的供试品溶液与对照品溶液进样，依 法测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，所述每粒胶囊中含独一味 以木樨草素计在0.4mg以上；

所述皂苷类含量的测定包括采用高效液相色谱法测定三七皂苷R1、 人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量，其中所述高效液相色谱的条件为： 填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为水和乙腈，梯度洗脱条件为 0～30分钟(81％水+19％乙腈)，30～65分钟(81～66％水+19～34％乙腈)， 65～70分钟(66～81％水+34～19％乙腈)，70～80分钟(81％水+19％乙腈)， 检测波长为203nm；并且，所述皂苷类含量的测定包括以下步骤：

1)供试溶液的制备：取所述胶囊内容物，研细，取约0.2g，精密称 定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流30分钟， 取出，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试 溶液；

2)对照溶液的制备：精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1 对照品和三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg10.4 mg，人参皂苷Rb10.4mg、三七皂苷R10.1mg的混合溶液，作为对照溶 液；

3)分别取步骤1)和2)所制备的供试品溶液与对照品溶液进样，依 法测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，所述每粒胶囊中含三七以 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1三种皂苷总量计不得低于30.0 mg；

所述独一味的鉴别采用薄层色谱法，其中所述薄层色谱鉴别法包括以 下步骤：

1)供试溶液的制备：取所述胶囊内容物1.0g，研细，加乙醇15ml， 加热回流15分钟，取出，滤过，滤液作为供试品溶液；

2)对照溶液的制备：取独一味对照药材1.0g，按照步骤1)所述方法 制成对照溶液；

3)照薄层色谱法试验，吸取步骤1)和2)所制备的两种溶液各5～ 10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇为展开剂， 所述展开剂中三氯甲烷-甲醇的体积比为1∶1～9∶1，展开，取出，晾干， 置紫外光灯254nm下检视，供试溶液色谱中，在与对照溶液色谱相应的位 置上，显相同颜色的斑点；

所述树脂残留物的检查包括：

1)供试溶液的制备：取胶囊剂内容物、片剂或颗粒剂，加入N，N-二 甲基甲酰胺和水，超声5分钟，作为供试溶液；

2)对照溶液的制备：分别取环己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、 对二乙苯和二乙烯苯用N，N-二甲基甲酰胺配制成贮备液；

分别取各贮备液混合后，用N，N-二甲基甲酰胺稀释成每1ml中含环己 烷4μg、苯0.4μg、甲苯4μg、二甲苯4μg、苯乙烯4μg、对二乙苯4μg和 二乙烯苯4μg的溶液，加水，混匀，作为对照溶液；和

3)分别取步骤1)和2)所制备的供试品溶液与对照品溶液进样，色 谱柱为聚乙二醇石英毛细管柱，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，含 环己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、对二乙苯和二乙烯苯应符合以下规 定：

含环己烷不得大于0.002％；含苯不得大于0.0002％；含甲苯不得大于 0.002％；含二甲苯不得大于0.002％；含苯乙烯不得大于0.002％；含对二 乙苯不得大于0.002％；含二乙烯基苯不得大于0.002％，

其中，所述树脂残留物的检查是采用极性毛细管柱顶空进样系统程序 升温法对环己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、对二乙苯和二乙烯苯进行 测定，其中所述极性毛细管柱顶空进样系统程序升温法的条件为：色谱柱 为聚乙二醇(PEG-20M)石英毛细管柱；柱温为程序升温，初始温度40℃， 保持5分钟，再以每分钟6℃升温至200℃，保持6分钟；检测器为氢火 焰离子化检测器(FID)，检测器温度为250℃；进样口温度为230℃；顶 空进样，顶空瓶平衡温度为70℃，平衡时间为45分钟。