[发明专利]微生物发酵法猪血清蛋白抗氧化肽的方法及其产品

说明书

技术领域

本发明涉及一种天然食品抗氧化剂的制备方法，尤其涉及一种采用微生物发酵 法制备具有抗氧化活性的猪血清蛋白多肽的方法以及由该方法制备得到的产品，属 于抗氧化多肽制品领域。

背景技术

动物血液是屠宰加工的主要副产物，蛋白质含量约为18％左右，但是在我国血 液的利用率却很低，因此造成蛋白资源的巨大的浪费并且随之带来较大的环境压 力。目前，利用不同蛋白资源开发功能多肽已经成为研究的热点。

猪血清蛋白具有良好的抗氧化作用，它保护生命的正常运行。血清蛋白是血液 循环中主要的抗氧化剂，根据文献报道，血清蛋白可以保护培养的细胞使其免受氧 自由基的伤害；血清蛋白能抑制铁离子催化的脂质氧化；体内试验研究则表明，血 清蛋白具有保护人的低密度脂蛋白(LDL)使其免受氧化和防止红细胞的溶血作用。

现有的猪血清蛋白抗氧化肽的制备方法在发酵过程中，由于微生物代谢，可产 生一系列的腥味或者腥臭味，影响了猪血清蛋白抗氧化肽的感官评定指标，因此需 要对发酵液进行脱腥脱臭处理，以增加其利用的价值和范围。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术的不足，提供一种猪血清蛋白抗氧化肽的制备 方法，该制备方法所得到的猪血清蛋白多肽在体外和体内均具有优异的抗氧化活 性；

本发明上述目的是通过以下技术方案来实现的：

一种采用微生物发酵法制备猪血清蛋白抗氧化肽的方法，包括以下步骤：

(1)将猪血清蛋白进行微滤处理；

(2)将微滤处理后的猪血清蛋白接种枯草芽孢杆菌菌悬液，发酵；

(3)将发酵液经离心，取上清液，浓缩，冷冻干燥，即得；

步骤(1)中所述的猪血清蛋白的浓度优选为2-6％(w/w)，更优选为4％(w/w)；

步骤(1)中所述的微滤处理优选为：将猪血清蛋白经过0.45μm的微孔率膜 过滤杀菌；

步骤(2)中所接种的枯草芽孢杆菌的接种量为1-5％(W/W)，优选为4％。

枯草芽孢杆菌是一种常见的、以周生鞭毛运动的革兰氏阳性芽孢杆菌。细胞染 色均匀，很少成链。芽孢椭圆形。菌落圆形或不规则形；表面色暗，有皱褶状，不 透明。在液体培养基中不混浊或轻度混浊，表面有呈暗色、带皱褶的菌膜飘浮。具 有较强的蛋白酶活力，主要应用于蛋白质的分解，提高蛋白利用率，以及提高多肽 的含量。枯草芽孢杆菌可以通过商业途径购买得到，例如，可以购自于中国工业微 生物菌种保藏管理中心，菌种编号为CICC10063；

步骤(2)中所述的发酵优选在以下条件下进行：发酵温度为30-37℃，发酵 时间为24-84小时；更优选的，所述的发酵在以下条件进行：发酵温度为30℃，发 酵时间为72小时。

其中，步骤(3)中为了达到更好的分离效果，优选的，将浓缩后的发酵液采 用超滤设备进行膜分离；更优选，将浓缩后的发酵液依次通过分子量为3000Da， 6000Da和10000Da的平板膜，可获得抗氧化活性最强的分子量在3000Da以下的肽 段，该肽段具有高的抗氧化活性和清除自由基的能力。

本发明方法所制备得到猪血清蛋白多肽主要由分子量在3000Da以下的混合猪 血清蛋白多肽组成，具有较高的抗氧化活性和清除自由基的能力，在体外和体内均 有良好的抗氧化作用以及护肝作用，可以作为抗氧化保健产品。

动物试验结果表明，本发明所制备的猪血清蛋白多肽能够显著降低CC1₄诱导肝 损伤大鼠血清中的谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平(P＜0.01)，从生理角 度考虑对大鼠的肝脏具有很好的保护作用，对健康是有益的；而且猪血清蛋白多肽 可提高大鼠肝脏组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、 过氧化氢酶(CAT)活力(P＜0.01)，提高肝脏组织的总抗氧化能力(T-AOC)(P＜ 0.01)，并且降低肝脏组织中的丙二醛(MDA)含量(P＜0.01)；并且可以在一定程度 上保护肝组织结构，减轻CC1₄对肝脏的损伤。说明本发明所制备的猪血清蛋白多肽 具有抗脂质氧化和清除自由基的能力，以及良好的护肝作用。

本发明猪血清蛋白多肽可以按照口服制剂的常规方法制备成胶囊剂、颗粒剂、 片剂或散剂等各种口服制剂，优选为胶囊剂。