[发明专利]快速检测病毒中和抗体的方法和试剂盒

权利要求书

1、检测被病毒(例如人肠道病毒)感染的细胞(优选培养细胞或细胞系)的方法，包括：(1)优选应用酶联免疫方法，使得被病毒感染的细胞带有可检测的信号，优选是能被斑点检测仪器检测到的信号或者适合于斑点检测法检测的信号，而未被病毒感染的细胞不带有该信号；和(2)优选通过应用斑点检测仪器或通过以斑点检测法，检测细胞是否带有该信号；

其中，使被病毒感染的细胞带有可检测的信号优选通过如下方法实现：使检测用病毒抗体(优选酶标检测用病毒抗体)与被感染细胞中的病毒或病毒蛋白特异结合，检测用病毒抗体(优选酶标检测用病毒抗体)能够直接产生或间接产生(例如通过显色反应)能够被斑点检测仪器检测的信号。

2、权利要求1所述的方法，用于检测被病毒感染的细胞的数量，或者用于病毒滴度的确定。

3、检测被病毒(例如人肠道病毒)感染的细胞(优选培养细胞或细胞系)的方法，包括：

(a)使病毒和靶细胞在适合病毒感染靶细胞的条件下接触，之后使所得产物和检测用病毒抗体在适合检测用病毒抗体与病毒或病毒蛋白结合的条件下接触，或者

(b)使病毒和检测用病毒抗体在适合检测用病毒抗体与病毒或病毒蛋白结合的条件下接触，之后使所得产物和靶细胞在适合病毒感染靶细胞的条件下接触，或者

(c)使病毒、检测用病毒抗体和靶细胞同时在适合病毒感染靶细胞且适合检测用病毒抗体与病毒或病毒蛋白结合的条件下接触；

所述方法优选还包括：检测靶细胞中特异性结合的检测用病毒抗体，或者检测靶细胞中包含特异性结合的检测用病毒抗体的细胞或其数量；

其中，所述检测用病毒抗体优选是特异结合病毒或者病毒蛋白(特别是病毒表面蛋白)的抗体，优选是单克隆抗体，也优选是在病毒感染靶细胞后在靶细胞中表达的病毒蛋白的特异性抗体；所述检测用病毒抗体可以带有标记的(优选酶标记的)或者未带有标记的；或者，所述检测用病毒抗体可以直接产生或间接产生(例如通过显色反应)能够被斑点检测仪器检测的信号。

4、一种检测样品中的病毒(例如人肠道病毒)中和抗体的方法，包括：使样品中可能存在的病毒中和抗体与病毒结合以阻断病毒对靶细胞的感染，并应用权利要求1-3任一项的方法检测被病毒感染的细胞，由此检测样品中的病毒中和抗体。

5、权利要求4的方法，其中所述方法用于检测样品中病毒中和抗体的存在与否和/或其效价。

6、权利要求1-5之任一项所述的方法，其中所述的斑点检测法获得的检测数据通过斑点检测仪器获得，斑点检测仪器优选能够用于分辨和测算细胞群中产生特定信号(例如颜色)的细胞的数量，优选Elispot。

7、权利要求1-6之任一项所述的方法，其中所述检测用病毒抗体是酶标抗体；或者，所述检测用病毒抗体是未标记的，所述方法还包括：使第二抗体和靶细胞中可能存在的、特异结合的检测用病毒抗体结合，第二抗体是标记的(优选酶标记的)，并检测包含特异性结合的第二抗体的细胞或其数量，其中优选地，所述的酶是可以直接或间接产生能够被斑点检测仪器检测的信号的酶。