[发明专利]一种不含明胶的疫苗冻干保护剂

说明书

技术领域

本发明属于疫苗生产工艺技术领域，具体涉及一种不含明胶的疫苗保护剂的配方和使用方法。

背景技术

目前，预防性疫苗的应用使常见流行性传染病得到了有效控制，有效地降低了这些传染病的发病率和死亡率。但是，在贮藏、运输和临床使用过程中，应用现有生产工艺生产的疫苗产品不断地浮现一系列问题，诸如稳定性差，有效期短和不良反应率高等问题。随着疫苗的广泛应用和分子生物学和细胞生物学的飞速发展，研究发现，很多问题与疫苗产品的保护剂和佐剂有直接关系，特别是冻干疫苗产品中均需要使用冻干保护剂，其中的明胶或明胶衍生物能直接引起使被接种者过敏的变态反应。1993年，Kelso等报道，有些孩子对MMR联合疫苗过敏是由于疫苗中的明胶在被接种者机体内产生抗明胶分子的IgE抗体所致。明胶既可以引起细胞介导免疫反应，也可以引起非细胞介导免疫反应。为了减轻或避免在疫苗使用过程中出现的由明胶而引起的不良反应，专家们建议，使用明胶替代品或直接生产不含明胶的疫苗产品。

现有疫苗产品多数是以世界卫生组织所颁发的生物制品规程为标准生产的，标准中没有对保护剂中的明胶使用量明确加以限制。日本FDA于1986年批准的疫苗上市许可中，以及美国FDA批准的疫苗上市许可中，均没有把明胶作为生产疫苗的禁用成分。在早期的专利文献中，大多数生产技术的疫苗保护剂都含有明胶成分。

目前已经逐步开始研究和使用不含有明胶的疫苗产品。目前现有技术中不含明胶的疫苗保护剂虽然降低了对于人体的刺激性，但是对疫苗的保护效果不如常用的含有明胶的保护剂，使得疫苗在冻干过程中和储存过程中的稳定性下降，易发生失效。

目前，使用疫苗进行免疫接种已经成为世界各国预防流行病的主要手段。因此，本领域中急需一种改进的疫苗冻干保护剂，在降低对于人体的刺激性的同时仍能使疫苗具有较高的稳定性。

发明内容

本发明的发明人经过研究，发明了一种新的疫苗冻干保护剂，使用该保护剂得到的疫苗制品对于人体的刺激性大大降低，并且仍然能保持较高的稳定性和较长的有效期。

因此，本发明提供了一种用作疫苗冻干保护剂的组合物，所述组合物在用于疫苗的冻干过程时，所包括的各成分及其在冻干原液中的初始浓度为：人血清白蛋白3-20g/l、蔗糖30-100g/l、海藻糖10-30g/l、右旋糖酐10-50g/l、谷氨酸钠6-12g/l、尿素3-9g/l、精氨酸0.5-2g/l以及甘露醇10-100g/l，并且所述组合物中不含有明胶。

此外，本发明还提供了一种冻干疫苗的制备方法，其特征在于冻干过程中采用本发明的组合物。

此外，本发明还提供了本发明的组合物用于提高疫苗稳定性和安全性的用途。

本发明的冻干保护剂与现有技术的保护剂相比，对疫苗的保护效果更好。将本发明的冻干保护剂用于制备冻干疫苗时，可以提高疫苗在冻干过程和储存过程中的稳定性，并且大大提高了冻干疫苗产品对人体的安全性。

具体实施方式

因此，本发明提供了一种用作疫苗冻干保护剂的组合物，所述组合物在用于疫苗的冻干过程时，所包括的各成分及其在冻干原液中的初始浓度为：人血清白蛋白3-20g/l、蔗糖30-100g/l、海藻糖10-30g/l、右旋糖酐10-50g/l、谷氨酸钠6-12g/l、尿素3-9g/l、精氨酸0.5-2g/l以及甘露醇10-100g/l，并且所述组合物中不含有明胶。

在本发明的一个优选实施方案中，所述右旋糖酐为右旋糖酐70。

在本发明的另一个优选实施方案中，上述的本发明组合物中的蔗糖在冻干原液中的初始浓度为40-60g/l。

在本发明的又另一个优选实施方案中，上述的本发明组合物中的海藻糖在冻干原液中的初始浓度为10-30g/l。

在本发明的再另一个优选实施方案中，上述的本发明组合物中的甘露醇在冻干原液中的初始浓度为10-20g/l。

在本发明的第二方面，提供了一种冻干疫苗的制备方法，其特征在于在冻干过程中采用本发明的组合物。

在一个优选实施方案中，本发明提供了一种冻干水痘疫苗的制备方法，包括下列步骤：

(1)以水痘病毒Oka株为毒种，MRC-5株人二倍体细胞为培养基质；

(2)用培养基对MRC-5株人二倍体细胞进行扩增传代，其中细胞传代比例为1∶2-1∶4，以37℃培养3-5天；

(3)待MRC-5株人二倍体细胞生长成均匀、致密的单层细胞后，更换培养基维持液并加入毒种感染细胞；