[发明专利]溶解和结合荚膜多糖的疫苗

权利要求书

1.一种纯化细菌荚膜多糖的方法，所述细菌荚膜多糖来自脑膜炎奈瑟氏球菌、 流感嗜血菌，或肺炎链球菌，该方法包括以下步骤：

(a)用一种或多种阳离子洗涤剂使所述多糖沉淀，然后

(b)用纯的乙醇或乙醇和水的混合物使沉淀的多糖溶解;然后

(c)采用一步或多步过滤，处理步骤(b)中得到的多糖以除去杂质，然后

(d)加入钙盐，使多糖沉淀。

2.一种将细菌荚膜多糖与载体蛋白结合的方法，该方法包括

纯化所述多糖，包括以下步骤：(a)用一种或多种阳离子洗涤剂使所述多糖沉 淀，然后(b)用纯的乙醇或乙醇和水的混合物使沉淀的多糖溶解;其中所述多糖来 自脑膜炎奈瑟氏球菌血清组A、W135或Y，或来自流感嗜血菌，或来自肺炎链球菌;

将所述多糖与载体蛋白结合，其中所述载体蛋白是白喉类毒素或破伤风类毒 素;以及

与来自脑膜炎奈瑟氏球菌的荚膜糖混合，得到一混合物，所述混合物包含来自 血清组A和血清组C的荚膜糖，其中MenA糖与MenC糖的重量比大于1，且荚膜糖 与载体蛋白结合。

3.一种将细菌荚膜多糖与载体蛋白结合的方法，该方法包括

纯化所述多糖，包括以下步骤：(a)用一种或多种阳离子洗涤剂使所述多糖沉 淀，然后(b)用醇使沉淀的多糖溶解;其中所述多糖来自脑膜炎奈瑟氏球菌血清组 A、W135或Y，或来自流感嗜血菌，或来自肺炎链球菌;

将所述多糖与载体蛋白结合，其中所述载体蛋白是白喉类毒素或破伤风类毒 素;以及

用疏水色谱法、切线超滤或渗滤分离游离的和结合的糖。

4.一种将细菌荚膜多糖与载体蛋白结合的方法，该方法包括

纯化所述多糖，包括以下步骤：(a)用一种或多种阳离子洗涤剂使所述多糖沉 淀，然后(b)用纯的乙醇或乙醇和水的混合物使沉淀的多糖溶解;其中所述多糖来 自脑膜炎奈瑟氏球菌血清组A、W135或Y，或来自流感嗜血菌，或来自肺炎链球菌;

将所述多糖与载体蛋白结合，其中所述载体蛋白是白喉类毒素或破伤风类毒 素;以及

与来自脑膜炎奈瑟氏球菌的荚膜糖混合，得到一混合物，所述混合物包含来自 血清组A、C、W135、Y的荚膜糖，其中血清组A∶C∶W135∶Y的糖的重量比为1∶1∶1∶1， 1:1:1:2，2:1:l:1，4:2:1:1，8:4:2:1，4:2:1:2，8:4:1:2，4:2:2:1，2:2:1:1， 4:4:2:1，2:2:1:2，4:4:1:2或2:2:2:1，且所述荚膜糖与载体蛋白结合。

5.一种纯化细菌荚膜多糖的方法，该方法包括以下步骤：(a)用一种或多种阳 离子洗涤剂而不用惰性多孔载体使所述多糖沉淀，然后

(b)用纯的乙醇或乙醇和水的混合物使沉淀的多糖溶解;

其中所述细菌荚膜多糖来自脑膜炎奈瑟氏球菌、流感嗜血菌，或肺炎链球菌。

6.一种纯化细菌荚膜多糖的方法，所述细菌荚膜多糖来自脑膜炎奈瑟氏球菌、 流感嗜血菌，或肺炎链球菌，该方法包括以下步骤：(a)用一种或多种阳离子洗涤 剂使所述多糖沉淀，然后

(b)用醇使沉淀的多糖溶解;

其中所述醇包含乙醇，乙醇的最终浓度为65-95%。

7.一种纯化细菌荚膜多糖的方法，该方法包括以下步骤：(a)用一种或多种阳 离子洗涤剂使所述多糖沉淀，然后

(b)用乙醇和水的混合物使沉淀的多糖溶解;所述细菌荚膜多糖来自脑膜炎奈 瑟氏球菌、流感嗜血菌，或肺炎链球菌。

8.如权利要求1-7任一项所述的方法，其中所述阳离子洗涤剂包含十六烷基 三甲基铵盐、四丁铵盐、十四烷基三甲铵盐和/或海地美溴铵。

9.如权利要求1所述的方法，其中步骤(c)包含深度过滤、通过活性碳的过滤、 筛分过滤和/或超滤。

10.如权利要求2-7任一项所述的方法，然后使步骤(b)或(c)得到的多糖沉淀。