[发明专利]从植物性食物蛋白原料中提取活性多肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及多肽制备方法，特别涉及从植物性食物蛋白原料中提取活性多肽的方法。

背景技术

植物性食物蛋白原料包括各种饼粕(如大豆粕、菜籽粕、花生粕、葵花籽粕、棉籽饼粕、亚麻籽粕，芝麻饼粕、玉米胚芽粕、小麦胚芽粕、米糠粕等)和各种蔬菜、水果、谷物加工过程中产生的富含蛋白质的副产品。目前多制成蛋白质饲料或肥料，尚未得到较好的综合利用。

食物蛋白来源的多肽是食物蛋白质经过降解后产生的由数个至数十个氨基酸组成的多肽的混合物。其不仅具有良好的加工特性，而且具有比氨基酸和蛋白质更佳的营养吸收特性，可作为营养吸收或过敏障碍的患者或婴幼儿的主要氮源。近年来，诸多具有生理活性的多肽的揭示更是为食物蛋白来源的多肽的开发应用提供了更加广阔的前景。至今，已从不同来源的食物蛋白中分离鉴定出具有促进矿物质吸收、免疫调节、类吗啡或抗吗啡、降血压、抗氧化以及促进细胞增殖等生理活性的多肽。因此，从植物性食物蛋白原料中提取活性多肽，是综合利用植物性食物蛋白原料的一条有效途径。

目前，从植物性食物蛋白原料中提取活性多肽的方法主要采用酶解法。因多数植物性食物蛋白原料中含有营养不利因子或毒性物质，如棉籽粕中的棉酚、菜籽粕中的硫葡萄糖苷等，故现有方法多采用先脱毒，再提取蛋白质，最后酶解蛋白质的三步法工艺，存在工艺路线长、操作复杂、生产成本高、难于规模化生产等缺点。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种从植物性食物蛋白原料中提取活性多肽的方法，工艺路线短，操作简单，生产成本低，适于规模化生产。

为达到此目的，本发明提供了一种从植物性食物蛋白原料中提取活性多肽的方法，包括以下步骤：称取植物性食物蛋白原料，加入有机溶剂提取，过滤，弃去滤液，滤饼除去残留的有机溶剂后，加水制成浆状液，再加入蛋白酶水解，当水解度达到30～60％时终止水解，离心，收集上清液，即得活性多肽。

进一步，所述有机溶剂选自甲醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯和体积百分比浓度为50～100％的乙醇中的一种或多种；

进一步，所述提取方法为回流提取0.5～3小时或在温度T为25℃≤T＜有机溶剂沸点的条件下浸泡提取3～24小时；

进一步，所述滤饼加水制成质量体积百分比浓度为1～10％的浆状液；

进一步，所述蛋白酶选自胃蛋白酶和/或胰蛋白酶；

进一步，所述蛋白酶的用量为滤饼重量的0.2～5％；

进一步，所述终止水解的方法为温度80～100℃加热10～30分钟或调节溶液pH使酶失去活性。

本发明的有益效果在于：本发明方法是先用有机溶剂提取植物性食物蛋白原料中含有的营养不利因子或毒性物质，弃去提取液，再直接用酶水解蛋白质；与现有技术相比，本发明减少了提取蛋白质的步骤，具有工艺路线短、操作简单、生产成本低、适于规模化生产等优点，所得含有活性多肽的上清液可以直接应用于食品添加剂、保健食品和医药领域，也可以超滤脱盐后使用或浓缩干燥成粉末使用，还可以进一步分离纯化制备高纯度的活性多肽。

具体实施方式

植物性食物蛋白原料中含有的营养不利因子或毒性物质可以用有机溶剂提取除去。有机溶剂及提取方法可以根据所用植物性食物蛋白原料中含有的营养不利因子或毒性物质的具体性质进行选择。在本发明中，有机溶剂优选甲醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯和体积百分比浓度为50～100％的乙醇中的一种或多种，最优选体积百分比浓度为50～100％的乙醇；提取方法优选回流提取0.5～3小时或在温度T为25℃≤T＜有机溶剂沸点的条件下浸泡提取3～24小时，温度升高则浸泡时间缩短。从提取液中回收的有机溶剂可以重复使用。

许多蛋白酶都可用于植物性食物蛋白原料的水解。对一种蛋白酶或蛋白酶混合物的选择，主要从蛋白酶的相对特异程度、所需水解程度以及活性多肽的用途等几方面进行考虑。在本发明中，优选胃蛋白酶、胰蛋白酶或二者的混合物。

酶解反应主要有四个重要参数：底物浓度、酶与底物的比例、温度以及pH。底物浓度以及酶与底物的比例的选择，可以从技术以及经济角度两方面考虑。较高浓度的底物通常产生相对较粘的浆液，从而限制酶的扩散，且在分散过程中易产生大量气泡，从而对后续处理造成干扰；而较低浓度的底物不能确保底物饱和度，会导致产率过低。温度以及pH通常选择所使用的蛋白酶活性的最适温度和pH。在本发明中，底物的质量体积百分比浓度优选为1～10％，酶的用量优选为底物重量的0.2～5％。