[发明专利]检测志贺氏菌的酶免疫传感器及其制备方法和运用

权利要求书

1.检测志贺氏菌的酶免疫传感器，其特征是包括丝网印刷电极，所述丝网印刷电极的工作电极上涂布有包埋“酶标记志贺氏菌抗体-碳纳米管-壳聚糖”混合物的敏感膜；所述的酶标记志贺氏菌抗体为辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氧酶、葡萄糖氧化酶、青霉素酰化酶、尿素水解酶标记的志贺氏菌抗体中的一种或它们的混合物。

2.如权利要求1所述检测志贺氏菌的酶免疫传感器，其特征是所述的碳纳米管为多壁碳纳米管。

3.如权利要求2所述检测志贺氏菌的酶免疫传感器，其特征是所述的志贺氏菌为福氏志贺氏菌。

4.制备权利要求1所述酶免疫传感器的方法，其特征是包括以下步骤：

1)  将碳纳米管超声分散在壳聚糖溶胶中，得均一的碳纳米管-壳聚糖复合物；

2)  将酶标记志贺氏菌抗体与碳纳米管-壳聚糖复合物充分混合均匀，4 ^oC放置12 h，制得“酶标记志贺氏菌抗体-碳纳米管-壳聚糖”混合物；所述的酶标记志贺氏菌抗体为辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氧酶、葡萄糖氧化酶、青霉素酰化酶、尿素水解酶标记的志贺氏菌抗体中的一种或它们的混合物；

3) 将“酶标记志贺氏菌抗体-碳纳米管-壳聚糖”混合物涂布在丝网印刷电极的工作电极表面，室温下干燥成膜；

4) 涂膜后的电极浸泡于含0.2%牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲溶液中，4 ^oC下放置1 h。

5.检测志贺氏菌的方法，其特征是包括以下步骤：

1）待测样本滴于如权利要求1所述酶免疫传感器的工作电极表面，28 ^oC孵育30 min；

2）免疫传感器置于电解池中，电解池的检测底液为含有0.6 mmol/L H₂O₂和1.0 mmol/L 硫堇的醋酸盐缓冲液，pH值为7.0；

3）设定适宜的扫描参数，对工作电极施加电压，检测辅助电极与工作电极间的电流值；

4）测定获得的电流信息输入数据采集与处理系统；

5) 信息处理结果输出。

6.如权利要求5所述的检测志贺氏菌的方法，其特征在于数据采集与处理系统采用循环伏安法作为免疫电极表征、定性判定和定量检测的方法。