[发明专利]红树莓的组织培养与快速繁殖方法

权利要求书

1.一种红树莓的组织培养与快速繁殖方法，其特征在于包括下列工艺 步骤：

A、将经过消毒灭菌处理过的红树莓外植体——即红树莓的茎尖或带芽 茎段，接种到下列诱导培养基中：

MS培养基

糖              30～40g/L

琼脂            5～7g/L

BA              0.5～1.5mg/L

NAA             0.1～0.3mg/L

pH              5.8～6.0

在光照强度为1500～2000lx，温度为20～27℃，光周期为8～10h/d 培养条件下，培养至外植体萌发叶分化成芽丛，切下芽丛，而外植体继续 在诱导培养基中，反复诱导培养至长出新芽丛，以25～35天为周期转接继 代一次；

B、将A步骤切下的芽丛依次转接至下列增殖培养基I和II中：

增殖培养基I：

MS培养基

糖              30～40g/L

琼脂            5～7g/L

BA              0.5～1.0mg/L

NAA             0.2～0.3mg/L

pH              5.8～6.0

增殖培养基II：

MS培养基

糖              30～40g/L

琼脂            5～7g/L

BA              1.0～1.5mg/L

NAA             0.1～0.2mg/L

pH              5.8～6.0

并在光照强度为1500～2000lx，温度为20～27℃，光周期为8～10h/d 培养条件下，进行增殖培养，且在增殖培养基I和II中，分别每25～35天 继代一次，得增殖倍数为2.5～3的芽丛，如此反复进行增殖培养至所需数 量的芽丛，并使芽丛长成2～3节、高2～3cm的芽苗，切下；

C、将B步骤切下的芽苗分成单株，接种到下列生根培养基中，在光照 强度为1500～2000lx，温度为20～27℃，光周期为8～10h/d培养条件 下，生根培养至芽苗长大并生根：

1/2MS培养基

糖            30～40g/L

琼脂          5～7g/L

IAA           0.1～0.2mg/L

NAA           0.3～0.5mg/L

pH            5.8～6.0；

D、将上述C步骤的生根苗移至室外散射光下锻炼6～10天后，取出生 根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为0.1％的多菌灵溶液中消 毒1～2分钟，移栽至装有下列基质的育苗袋中：腐殖土∶红土＝1∶1质量比 的基质中，该基质中混合有质量比为4～7％的珍珠岩，即得红树莓种苗。

2.如权利要求1所述的红树莓的组织培养与快速繁殖方法，其特征在 于所述A步骤的对红树莓外植体进行消毒灭菌处理为：在无菌超净台中， 将经洗涤剂清洗过的2～3cm茎尖或带芽茎段，依次在体积浓度为70％～75％ 的酒精中消毒处理30～60秒、在质量浓度为0.1％～0.15％的HgCl₂中灭菌处 理6～10分钟、在体积浓度为1.5％～2％的次氯酸钠溶液中消毒处理15～20 分钟，之后用无菌水漂洗2～3次，即可。