[发明专利]一种烟草青枯病抗性的苗期鉴定方法

权利要求书

1.一种烟草青枯病抗性的苗期鉴定方法，其特征在于步骤如下：

1)建造保温加热循环漂浮池

在玻璃温室或塑料大棚温室内建造，池底垫一层厚约4cm的泡沫塑料板，整个池壁四周用泡沫塑料板保温，铺2层塑料膜，池内水深5cm～20cm，一端设由控温电加热棒和池水循环泵构成的加热控温设备加热池水，保持水温为25.0℃～28.0℃：

2)烟苗移植及日常管理

烟苗两次剪叶后，株高9cm～11cm，苗龄45d～55d，每个待鉴定材料挑选15～200株，用漂浮盘移植到保温加热循环漂浮池中，以NC95品种为抗病对照，以Hicks品种为感病对照，漂浮池营养液的氮素浓度控制在100mg/kg～250mg/kg，在水中加58％甲霜灵锰锌防治真菌病害，根据池水蒸发量，经常补充池水至初始水深，采用自动温湿度记录仪每小时记录一次水温；

3)接种

将保存的青枯菌菌株使用前在TTC培养基上活化48h，挑典型单菌落至TTC平板培养基上，28℃培养48h；将菌苔刮下，接种到1/10BG培养液，28℃震荡培养36h至48h，培养液于5000×g离心15min收集菌体，用井水或过夜自来水配成菌悬液即可接种，接种时在漂浮池中加入青枯菌悬液，根据菌悬液OD₆₀₀值，调整池水中菌浓度至1×10⁷cfu/mL～1×10⁸cfu/mL；

4)病情调查与分级

接种后10d调查发病情况，以后每隔2d～3d调查一次发病情况，记录发病率及病情指数，以感病对照发病率达到80％的病情指数作为品种抗性评价标准。

2.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于：步骤1)所述的保温循环漂浮池为常规漂浮池增加泡沫塑料板保温层和金鱼缸用加热控温设备，池水为深井水或自来水。