[发明专利]基于免疫毛细管电泳-激光诱导荧光的基因组DNA整体甲基化水平分析无效
申请号: | 200910092317.1 | 申请日: | 2009-09-10 |
公开(公告)号: | CN101638689A | 公开(公告)日: | 2010-02-03 |
发明(设计)人: | 汪海林;王晓利 | 申请(专利权)人: | 中国科学院生态环境研究中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N33/561;G01N21/64 |
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地址: | 100085*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 免疫 毛细管 电泳 激光 诱导 荧光 基因组 dna 整体 甲基化 水平 分析 | ||
1、一种DNA整体甲基化水平的高效快速检测方法,其特征在于利用免疫毛细管电泳-激光诱导荧光技术进行检测。
2、基于权利要求1所述,其检测依次包括以下步骤:
1)待测DNA中甲基化DNA与抗体反应的选择性荧光标记;
2)免疫毛细管电泳-激光诱导荧光技术分离检测DNA-抗体免疫复合物;
3)对DNA-抗体免疫复合物进行定量分析,确定待测DNA中整体甲基化水平。
3、基于权利2,甲基化DNA的抗体选择性标记包括两种方式:
1)采用荧光标记的二级抗体标记可特异性识别甲基化DNA的一级抗体;
2)将可特异性识别甲基化DNA的一级抗体直接与反应性荧光染料反应,实现一级抗体的直接荧光标记。
4、基于权利3,其特征在于:一级抗体和二级抗体的荧光标记包括有机荧光染料、量子点、荧光珠、稀土荧光分子等有荧光特性的材料。
5、基于权利要求2所述,待测DNA包括:
1)人和动物各种组织DNA,包括血液、心、肺、肝、肾、膀胱、消化道、脑、脊髓液、精液等;
2)各种细胞DNA;
3)细菌DNA;
4)各种病人组织DNA。
6、基于权利1所述的方法,其特征在于:本发明可以用于DNA整体甲基化水平检测试剂盒的发展。
7、基于权利1、2、3、4、5和6所述的方法,其特征在于:本发明可应用于天然产物、合成药物、中草药中有效成分的筛选。
8、基于权利1、2、3、4、5和6所述的方法,其特征在于:本发明可应用于环境污染物对生物体DNA整体甲基化水平影响的快速筛选;应用于癌症等人类疾病的表观遗传学快速评估。
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