[发明专利]一种HIV复合多表位DNA疫苗及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种艾滋病疫苗，特别是涉及一种以HIV抗原表位为基础的新型基因工程治疗预防两用DNA疫苗，以及其构建模式和其应用。

背景技术

艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome，AIDS)在全球的迅速蔓延，已成为威胁人类最严重的病毒病之一。联合国艾滋病规划署发表的《2008年全球艾滋病疫情报告》中指出，2007年新增艾滋病病毒感染者为250万人，到2008年，全球共有3320万名艾滋病病毒感染者，其中2250万名感染者分布在撒哈拉沙漠以南的众多非洲国家；亚洲有近500万名感染者；东欧和中亚地区约150万名；拉美地区约170万名；北美、西欧和中东欧地区约200万名。其中绝大多数艾滋病病毒感染者生活在世界欠发达地区。在中国，到2008年9月底，全国累计报告艾滋病病毒感染者26万多例，其中艾滋病病人7.7万余例，死亡3.4万余例。仅2007年，就新增艾滋病病毒感染者5万人，相当于每天有140人被感染。其状况非常令人担忧。目前HIV感染者的药物治疗费用每人每年需要1.2-5.0万美元，这样大的费用即使在发达国家亦难以承受，何况迄今为止尚未见有真正有效的治疗药物。因此，世界各国将目标转向实用化AIDS疫苗的开发。国外投入了大量的资金和人力对艾滋病疫苗以及艾滋病毒的分子生物学和免疫学进行研究，希望早日遏止艾滋病在世界范围内尤其是发展中国家不断加速的蔓延趋势。HIV感染及引起的疾病对卫生组织保健资源和世界经济影响巨大。因此，研制具有良好免疫保护作用的预防性和治疗性疫苗接种健康人群和感染者具有重要的现实意义。

纵观艾滋病疫苗的研究历史，大致分成三个逐渐改进与完善的阶段，各个相邻阶段间存在一定相互交叉。

第一阶段(1984-1993年)：是艾滋病疫苗研究的起始阶段，主要特点是疫苗以单一的蛋白亚单位疫苗(gp120或gp160)为主，以诱导抗体预防病毒感染为主要目标，忽视细胞免疫的作用。

第二阶段(1994-1999年)：特点是强调疫苗的细胞免疫反应，但忽视了体液免疫的作用。

第三阶段(2000年至今)：总结了前两个阶段的教训，疫苗诱导的免疫反应更加注重体液和细胞免疫反应的均衡，伴随着超感染以及其他病毒逃逸细胞免疫现象的发现，有效抗艾滋病疫苗的概念被进一步更新。

在这三个阶段中，全球进行的AIDS候选疫苗的临床实验超过170项。其中进入II期临床研究的不到十分之一。其中的大多数都是小范围的I期临床实验，借以评价不同的HIV抗原和载体系统疫苗的安全性并获得初步的免疫数据。临床试验中测试的疫苗形式包括：

病毒样颗粒化疫苗。病毒样颗粒是利用HIV的GAG等基因自身可以组装成颗粒样结构的特性，在昆虫细胞-杆状病毒表达系统等中表达GAG等基因后分离纯化得到的一种不含病毒核酸的假病毒颗粒。由于它具有很强的免疫原性及很好的安全性，作为HIV的侯选疫苗倍受学者们的重视。至今只有英国生物技术PLC公司HIVp17/p24：Ty-VLP曾进行人体试验。

多肽疫苗。曾进行人体试验的多肽疫苗有Wyeth-Lederle的HIVC4-V3多价多肽疫苗，CIGB的TAB9，法国国家艾滋病研究机构的LIPO-6、LTB-36(gp24E-V3 MN)、LIPO-5、IPO-6T，Cel-Sci的HGP-30，UBI的SynVac、HIV免疫多价多肽疫苗、HIV-1免疫单多肽疫苗、P3C541b脂蛋白疫苗、Biovector Sar的PO-4T。

蛋白亚单位重组疫苗。曾进行人体试验的蛋白亚单位重组疫苗有VaxGen的AIDSVAX B/E，Genentech Inc/VaxGen的AIDSVAX B，GlaxoSmithKline的N/A，法国国家艾滋病研究机构的gp160MN/LAI-2，St Jude儿童研究医院的EnvPro，AVANT免疫治疗公司的LFn-p24，以及高级生物科学实验室的疫苗。

细菌载体重组疫苗。至今曾进行人体试验的细菌载体重组疫苗只有Chiron的Salmonella typhi CVD 908-HIV-1 LAI gp 120(VVG203)，目前已停止试验。