[发明专利]一种使用聚酰胺氢键吸附色谱分离纯化胸腺五肽的方法

权利要求书

1、一种使用聚酰胺色谱法分离胸腺五肽的方法，利用聚酰胺介质与胸腺五肽及其混合物中杂质之间吸附作用的差异，对不同来源的胸腺五肽进行纯化。

2、根据权利要求1所述使的使用聚酰胺色谱分离胸腺五肽的方法，其包括如下的步骤：

1)胸腺五肽溶液的制备：称取10mg固相合成的胸腺五肽粗品，将其溶于1ml水中配制成10mg/ml的胸腺五肽溶液，离心去除颗粒物；

2)取300目聚酰胺粉末，加入95％乙醇于室温110转/分钟振荡洗涤40-50分钟，倾出95％乙醇，用水洗至无醇味，再分别用5％氢氧化钠溶液及30％乙酸溶液按相同方法洗涤，最后用20％乙醇洗涤，装柱平衡至初始流动相，采用干法或湿法装填成柱；

3)聚酰胺介质湿法装柱，层析柱内径16mm，装填高度250mm，接入Akta Prime Plus层析系统，压力限2.5MPa，层析柱用流动相平衡2个柱床体积；

4)步骤1)制备好的胸腺五肽溶液，通过自动进样阀进样1ml；

5)等度洗脱，流速为0.8ml/min，紫外检测器280nm监测，收集洗脱峰；

6)聚酰胺色谱分离胸腺五肽的谱图如图1所示，分别收集各个洗脱峰，冻干后重新溶解，经RP-HPLC(C18柱)检测，其中所标示的峰为聚酰胺色谱峰，其纯度大于95％，收率大于90％。